SN/T 3676-2013
基本信息
标准号： SN/T 3676-2013
中文名称：甘蔗凋萎病菌检疫鉴定方法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 3676-2013.Detection and identification of Gibberella sacchari Summerell et Leslie.
1范围
SN/T 3676规定了甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定方法。
SN/T 3676适用于甘蔗种子、植株中甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定。
2甘蔗凋萎病菌基本信息
中文名:甘蔗凋萎病菌
学名:Gibberella sacchari Summerell et Leslie
无性态: Fusarium sacchari(E.J. Butler) W.Gams
分类地位:甘蔗凋萎病菌属真菌界(Fungi),子囊菌门( Ascomycota),子囊菌纲( Ascomycetes),粪壳菌亚纲(Sordariomycetidae)、肉座菌目(Hypocreales) ,肉座菌科( Hypocreaceae),赤霉菌属(Giberella)。
无性态为Fusarium sacchari (E. J. Butler) W. Gams,属丝孢菌纲( Hyphomycetes),丛梗孢目(Monilales) ,瘤座孢科( Tuberculariaceae) ,镰刀菌属(Fusaium)。
传播途径:病菌依靠带菌种子.种苗和病残体进行远距离传播。
甘蔗凋萎病菌的其他信息参见附录A。
3方法原理
病原菌的为害症状、分离培养性状、形态特征作为甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定依据。
4仪器设备和主要试剂
4.1仪器设备
培养皿(直径90mm~100mm)、三角瓶、镊子、手术剪、手术刀、接种针、棉纱、脱脂棉、酒精灯。
体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、电子天平、高压灭菌锅、常规冰箱(-20℃)、超
低温冰箱(-70℃)。
4.2 主要试剂
马铃薯、胡萝卜、番茄、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素、乳酸.1.0%次氯酸钠(NaCIO)。
1范围
SN/T 3676规定了甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定方法。
SN/T 3676适用于甘蔗种子、植株中甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定。
2甘蔗凋萎病菌基本信息
中文名:甘蔗凋萎病菌
学名:Gibberella sacchari Summerell et Leslie
无性态: Fusarium sacchari(E.J. Butler) W.Gams
分类地位:甘蔗凋萎病菌属真菌界(Fungi),子囊菌门( Ascomycota),子囊菌纲( Ascomycetes),粪壳菌亚纲(Sordariomycetidae)、肉座菌目(Hypocreales) ,肉座菌科( Hypocreaceae),赤霉菌属(Giberella)。
无性态为Fusarium sacchari (E. J. Butler) W. Gams,属丝孢菌纲( Hyphomycetes),丛梗孢目(Monilales) ,瘤座孢科( Tuberculariaceae) ,镰刀菌属(Fusaium)。
传播途径:病菌依靠带菌种子.种苗和病残体进行远距离传播。
甘蔗凋萎病菌的其他信息参见附录A。
3方法原理
病原菌的为害症状、分离培养性状、形态特征作为甘蔗凋萎病菌的检疫鉴定依据。
4仪器设备和主要试剂
4.1仪器设备
培养皿(直径90mm~100mm)、三角瓶、镊子、手术剪、手术刀、接种针、棉纱、脱脂棉、酒精灯。
体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、电子天平、高压灭菌锅、常规冰箱(-20℃)、超
低温冰箱(-70℃)。
4.2 主要试剂
马铃薯、胡萝卜、番茄、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素、乳酸.1.0%次氯酸钠(NaCIO)。
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标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T3676—2013
甘蔗凋萎病菌检疫鉴定方法
Detection and identification of Gibberella sacchari Summerell et Leslie2013-08-30发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2014-03-01实施
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局本标准主要起草人：刘跃庭、崔铁军、罗加凤、刘鹏、廖芳、张裕君SN/T3676-2013
1范围
甘蔗凋萎病菌检疫鉴定方法
本标准规定了甘蔗调萎病困的检疫鉴定方法本标准适用于甘蔗种子、植株中甘蔗调萎病菌的检疫鉴定。2甘蔗凋菱病菌基本信息
中文名：甘蔗调菱病菌
学名：Gibberella sacchari Summerell etLeslie无性态：Fusariumsacchari(E.J.Butler)W.GamsSN/T3676-2013
分类地位：甘燕调菱病菌属真菌界（Fungi），子囊菌门（Ascomycota），子囊菌纲（Ascoinycetes），类壳菌亚纲（Sordariomycetidae），肉座菌目（Hypocreales），肉座菌科（Hypocreaceae），赤霉菌属（Gibberella）。无性态为Fusariumsacchari（E.J.Butler）W.Gams：属丝孢菌纲（Hyphomycetes），丛梗孢目（Monilales）.瘤座孢科（Tuberculariaceae），镰刀菌属（Fusaium）传播途径：病菌依靠带菌种了、种苗和病残体进行远距离传播。廿蔗调萎病菌的其他信息参见附录A。3方法原理
病原菌的为害症状、分离培养性状、形态特征作为甘蔗调萎病菌的检疫鉴定依据。4仪器设备和主要试剂
仪器设备
培养皿（直径90mm~100mm）、三角瓶、镊子、手术剪、手术刀、接种针、棉纱、脱脂棉、酒精灯。体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、电子天平、高压火菌锅、常规冰箱（一20℃）、超低温冰箱（-70℃）。
主要试剂
马铃薯、胡萝卜、番茄、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素、乳酸、1.0%次氟酸钠（NaCIO)。5
鉴定方法
5.1症状检查
甘蔗种子
挑选畸形、瘦小等可疑种子进行分离培养。SN/T3676—2013
5.1.2甘蔗繁殖茎
将甘燕繁殖茎横切和纵切，检查蔗茎是否变色（参见附录A）-对变色的可疑材料进行分离培养2病原菌的分离培养
培养基的制备
马铃薯培养基（PDA）、胡萝卜培养基（CA）、香石竹叶培养基（CI.A）、V8-汁培养基的制备参见附录B
5.2.2病原菌的分离培养
5.2.2.1甘蔗种子中病原菌的分离培养将甘燕种子放人1.0%的次氛酸钠溶液中消毒5min.火菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸干水分后，置于PDA培养基平板上，每血放置20~30粒，25℃~3012h光照黑暗交替培养。培养3d后开始观察，发现乳灰白色可疑菌落，转接到CI.A培养基平板上诱导大型分生孢子产生，紫外线能促进大型分生孢子产生：可菌落转接到CA或V8汁培养基导子囊壳的产生：培养3d后开始观繁，记录菌落培养性状，观察大、小分生孢子和子囊壳的产生·在显微镜下观察并测量大、小分生孢子，子囊壳和子囊孢子的形状及大小
5.2.2.2甘蔗繁殖茎中病原菌的分离培养挑选出的甘蔗材料剪成0.4cm×.0.4cm小块，用纱布包好.放人1.0%的次氯酸钠溶液中，消毒5min，灭菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸十水分后，置于PDA培养基平板上，每Ⅲ放置3~4块，培养方法同5.2.2.1。
6鉴定特征
6.1培养性状
在PDA培养基上菌丝大量生长，开始灰自色，随时间逐渐变为紫色，培养6d～10d后菌落中产生分生孢子，在PDA上菌落边缘不整齐，生长较缓慢，生长速度约3.9nm/d气生菌丝纤细。（参见图C.1）6.2
形态特征
有性态：了囊壳表牛，青紫色，倒卵形，有疣状突起，表面粗糙。子囊梭形，开裂，内有子囊抱子8个：直径250μm~390um（平均310um），有侧丝。子囊壳在3%的氢氧化钾溶液中不变色，在100%的乳酸中变成红色了囊壳由分区明显的内外两层构成，外层厚18μm~39μ加（平均30.6m），内层厚4.4um~5.9μm（平均4.9μm），外层细胞大，内层细胞小。子囊孢子从孢子角溢出，光滑，透明，椭圆形或倒卵形，两端钝圆0～1个分隔：一股为1个分隔：分隔处稍缩，子囊孢子大小（28m～32m）×（3um4.5um）（平均30.4um×4.2m）。子囊壳和子囊孢子的大小是鉴定甘熹调菱病菌的重要特征（参见图C.2）.甘燕调萎病菌与近似种的区别参见附录D无性态：大型分生孢子（38um68μm）×（4.0#m~5.0mm），细长，镶刀形，壁薄.3~4个分隔，通常3个分隔，有时产生蓝色或黑色的菌核。小型分生孢子（9μm~12μm）×（3.0um~3.5um），卵形，无隔，单胞。小分生孢子在单分生孢子梗或聚分生孢子梗上假头状大量产生（参见图C.3）。2
-rKAoNiKAca
结果判定
病原菌培养性状和形态特征衍合6.1及6.2中描述。可鉴定为甘燕调萎病菌8
样品保存与处理
SN/T3676—2013
样品经登记和经于人签字后要善保存。对检出甘蔗凋萎病菌的样品应保存于4℃冰箱中，以备复核。该类样品保存期满后须经高压灭菌后方可处理。9
菌株保存与处理
从检测样品中分离并鉴定为甘蔗调菱病菌的菌株，应妥善保存。将菌株接种于PDA培养基斜面
上，存活后置于4℃～8℃黑暗条件下保存，定期（3个月）转接，以防止病菌死亡，至少保存6个月，必要时用病菌分生孢子作冻干菌种保存。保存期满后高压灭活处理。10
结果记录与资料保存
实验记录包括样品的来源、种类，时间，实验的时间，地点方法和结果等，并有实验人员和审核人员签字。
KAoNiKAca
SN/T3676—2013
A.1病菌名称
中文名称：廿蔗调萎菱病菌
英文名称：sugarcanetoprot
pineapple cye rot
pine canker pitch
maize scedling blight
sugarcanc top rot
maizewilt
pineapple fruit rot
附录A
（资料性附录）
甘蔗凋萎病菌其他信息
flowermalformationof mango
异名：Gihberellafujikuroivar.subglutinansEdwardsGibberella subglutinans Nelson et alFusarium sacchari var.elongatumFusariumsaccharivar.subglutinans(Wollenw.&.Reinking)NirenbergFusarium moniliforme var.subglutinans Wollenw.&ReinkingFusarium subglutinans Nelson et al.Cephalosporium sacchari E.J.Butler etHafizKhanGibberella moniliforme var.subglutinans Woll.&Rei.A.2
2症状特征
甘蔗调萎病菌在发病初期，通常发生在甘蔗下部，症状一般不明显，当甘蔗长至一半高度时，发病严重的甘蔗死亡才引起重视。病害造成甘煎生长缓慢，植株矮化，不分藥，产生大小不等的病斑，病害迅速在日间传播开来，到收获时，甘蔗枯萎，先是叶片如缺水般下枯，接着是蔗茎变空变轻。将枯萎的燕茎开，发现内部有特征性的变色。弥漫性的紫色或暗红色代替了被白色区域横向扩展打破的亮红色斑块和条纹，在病害早期变色的特点是该病害区别于其他病害的显著特征。在老甘蔗中，红色几乎消失，取而代之的是土褐色。在甘蔗空腔内，经常发现蓬松的灰色霉层。A.3
3寄主范围
甘蔗Saccharum.officinarum、高粱Sorghumbicolor.兰花Cymbidiumspp..玉米Zeamays、菠萝Ananascomosus、芒果Mangiferaindica、松树Pinusspp.等。A.4地理分布
欧洲：德国、波兰，奥地利、匈牙利、意人利。KAoNiKAca
美洲：墨西哥、美国、阿根廷、巴西、古巴、洪都拉斯非洲：马里、毛里求斯、南非。亚洲：孟加拉国、印度、日本，阿拉伯联合酋长国、中国台湾大洋洲澳大利亚、新西兰。
A.5传播途径
SN/T3676—2013
病菌依靠带菌种子、种苗和病残体进行远距离传播。病菌产生的大量孢子是初侵染源。病菌通常通过伤口、蔗茎节上的芽眼或种植时的切口进行侵染，造成种植时大量嫩株在前3个月内枯萎。生长后期，病菌通过伤口侵染
TTKAOiKAca
SN/T3676—2013
B.1马铃薯培养基（PDA)
附录B
（资料性附录）
培养基配制方法
马铃薯去皮后洗净，切成小块.称取200g，蒸馏水中煮30min，用4层纱布过滤，加入10g~20g燕糖、17g~-20g琼脂，加热使之完全溶解.蒸水定B.2胡萝卜培养基(CA)
121℃高压灭菌15ming
l000mL
新鲜胡萝下洗净，切碎，称取200g，加蒸馏水500mL，用组织捣碎机捣碎，用4层纱布过滤去渣，加人15g~20g琼脂，加热使之完全溶解，蒸馏水定容至1000mL.121℃高压灭菌15min。B.3麝香石竹叶片培养基（CLA）取新鲜的无杀真菌剂和杀虫剂污染的爵香石竹叶片切成5mm8mm，-70C冷冻干燥3h~4h
直到叶片变脆，将干燥后的叶片放在铝制或聚碳酸酯的容器中，用伽马辐照进行灭菌。称取20g琼脂，蒸馏水定容至1000mL.加热使之完全溶解，121℃高压灭菌15min。按照每2mL加一片干燥的叶片的标准将叶片加人培养基中，一般90cm的培养血中加叶片9～10片。B.4V8-汁培养基
5mlLV8-汁，碳酸钙0.02g.琼脂2g，蒸馏水定容至100ml,121℃高压灭菌15min。6
irkAoNiKAca
注：引自IshwarDaselal.2000
附录C
（资料性附录）
甘蔗调萎病菌形态特征及症状表现图C.1PDA培养基上菌落培养性状SN/T3676—2013
图C.2甘蔗凋菱病菌Gibberella sacchari子囊壳、子囊和子囊孢子在胡萝卜培养基上形态特征SN/T3676-—2013
说明：
了囊壳，标尺一20cum；
子囊壳横切面.3标尺-50um+4标尺-25um；子毫，5标尺-50um，6标尺-25Mm：子囊他子，标尺=25m，
注：引白J.F.Leslie+etal.2005.图C.2（续）
说明：
大分生孢子：
小分牛生孢了：
麝香石竹培养基上分生他子梗上的小分生孢子，标尺一25μI1。注：引自J.F.Lesliesetal,2005图C.3甘蔗凋萎病菌Fusariumsacchari形态特征8
附录D
（资料性附录）
SN/T3676—2013
甘蔗凋萎病菌Gibberellasacchari与近似种子囊壳、子囊孢子的区别表D.1
病原菌
Gibberella sacchari
Gibberella fujikuroi
Gibberella intermedia
Gibberella thapsina
Gibberella monilifnrmis
Gibherela sbglutinans
Gibberella circinata
Gibberella nygamai
甘蔗凋萎病菌与近似种子囊壳、子囊孢子的区别表了囊壳大小（直径平均值）/um
子囊孢子大小（平均值）/um
30.4μmX4.2μm
12.5μm×4.7μm
14.6μm×4.8μmbZxz.net
17.0μmX8.0μm
17.5μmX4.8μm
19.6μmX5.9μm
12.7μmX5.2μm
13.9μmX5.3μm
SN/T3676-2013
参考文献
iButler EJ,Khan AH.1913.Some new sugarcane discases.Mem Dept Ag in India,BotSer.6:185-190.
[2JEganBT,Magarey RC.CroftBJ.1997.Sugarcane.In:HillocksRI.Walker JM,eds.Soilbornediseasesoftropical crops.CABInternational:Wallingford,Oxon.U.K.p277302.[3]Huss MJ.Camphell C.,JenningsDB,Leslie JF.1996.Isozyne variation among biologicalspecies in the Gibberella fujikuroi species complex(Fusurium section Liseola).Appl Environ Microbiol,62:3750-3756.
[4] Marasas WFO.Rheeder JP,Lamprecht SC.Zeller KA.LeslieJF.200l.Fusarium andiyazesp.nou..a new species from sorghum.Mycologia.93:1203-110.[5]YanK,DickmanMB,Xu]
Sensitivity
Held strains of Gibherellafujikuroispecies complex(Fusarium sectionLiseola)tghygromycinB.Mycologia,85.206-213.cbenomyl and
L6XuJR.Yan K,Dickman MB,LeshiiE1995D
logical species of Gibberellafujikurospecies
Plant Microbe Interact,8:74-84.detrophorctickaryotypes distinguishthebio-cemplex(FusariumscctionLiseola).MolecL7]WollenweberHw,ReinkingAO.1925-AliquotFusaria tropicalia,nova vel rexisa,Phytopa-thology,15:155-169.
[8] The fusarium laboratory
[9LeslieJE,BA.Summerell,S.Bullock,andof Fusariums sacchari.Myrologia,97[10]Das Ishwar.BajpaiAlvanar20Cephalosporium sacchari on agarplales
ganic,Physical,Thcoretical&.AnalyticaL11] Leslie JF,Summere
nmerell,SuzanneBullock
5.Gibberellasacchari,thetclcnonorpho.Growth patferns and light induced kinetics of thefungiIndian
Bullock
saechari and neotypification ofiitsanamorph
.Section A:Inorganic,Bio-inorofChemistry
Suzain
[12Nirenberg.11I.and ODonnell,K.1998.NGibberellafujikuroi spcicsromplex.Mycologia.s[13]Matos,APde.Mourichon
subglutinans on pineapple in Bolivia,Frults［14]
2005.Description of Gibberellalogia.97(3)：718-724.
sacchariMyeo
yFusarium speeies and combinations within the434458
enceof Fusariummoniliformevar.Gams W.1971.Cephalosporium-artige Schimmelpilze (Hyphomycetes).StuttgartGermany:Gutav Fischer Verlag.15
CABInternational.20o7.CropProtectionCompendium.2oo7.Edition,Wallingford,CK
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甘蔗凋萎病菌检疫鉴定方法
Detection and identification of Gibberella sacchari Summerell et Leslie2013-08-30发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2014-03-01实施
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局本标准主要起草人：刘跃庭、崔铁军、罗加凤、刘鹏、廖芳、张裕君SN/T3676-2013
1范围
甘蔗凋萎病菌检疫鉴定方法
本标准规定了甘蔗调萎病困的检疫鉴定方法本标准适用于甘蔗种子、植株中甘蔗调萎病菌的检疫鉴定。2甘蔗凋菱病菌基本信息
中文名：甘蔗调菱病菌
学名：Gibberella sacchari Summerell etLeslie无性态：Fusariumsacchari(E.J.Butler)W.GamsSN/T3676-2013
分类地位：甘燕调菱病菌属真菌界（Fungi），子囊菌门（Ascomycota），子囊菌纲（Ascoinycetes），类壳菌亚纲（Sordariomycetidae），肉座菌目（Hypocreales），肉座菌科（Hypocreaceae），赤霉菌属（Gibberella）。无性态为Fusariumsacchari（E.J.Butler）W.Gams：属丝孢菌纲（Hyphomycetes），丛梗孢目（Monilales）.瘤座孢科（Tuberculariaceae），镰刀菌属（Fusaium）传播途径：病菌依靠带菌种了、种苗和病残体进行远距离传播。廿蔗调萎病菌的其他信息参见附录A。3方法原理
病原菌的为害症状、分离培养性状、形态特征作为甘蔗调萎病菌的检疫鉴定依据。4仪器设备和主要试剂
仪器设备
培养皿（直径90mm~100mm）、三角瓶、镊子、手术剪、手术刀、接种针、棉纱、脱脂棉、酒精灯。体视显微镜、生物显微镜、超净工作台、生物培养箱、电子天平、高压火菌锅、常规冰箱（一20℃）、超低温冰箱（-70℃）。
主要试剂
马铃薯、胡萝卜、番茄、葡萄糖、琼脂、青霉素、链霉素、乳酸、1.0%次氟酸钠（NaCIO)。5
鉴定方法
5.1症状检查
甘蔗种子
挑选畸形、瘦小等可疑种子进行分离培养。SN/T3676—2013
5.1.2甘蔗繁殖茎
将甘燕繁殖茎横切和纵切，检查蔗茎是否变色（参见附录A）-对变色的可疑材料进行分离培养2病原菌的分离培养
培养基的制备
马铃薯培养基（PDA）、胡萝卜培养基（CA）、香石竹叶培养基（CI.A）、V8-汁培养基的制备参见附录B
5.2.2病原菌的分离培养
5.2.2.1甘蔗种子中病原菌的分离培养将甘燕种子放人1.0%的次氛酸钠溶液中消毒5min.火菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸干水分后，置于PDA培养基平板上，每血放置20~30粒，25℃~3012h光照黑暗交替培养。培养3d后开始观察，发现乳灰白色可疑菌落，转接到CI.A培养基平板上诱导大型分生孢子产生，紫外线能促进大型分生孢子产生：可菌落转接到CA或V8汁培养基导子囊壳的产生：培养3d后开始观繁，记录菌落培养性状，观察大、小分生孢子和子囊壳的产生·在显微镜下观察并测量大、小分生孢子，子囊壳和子囊孢子的形状及大小
5.2.2.2甘蔗繁殖茎中病原菌的分离培养挑选出的甘蔗材料剪成0.4cm×.0.4cm小块，用纱布包好.放人1.0%的次氯酸钠溶液中，消毒5min，灭菌水冲洗3次，用灭菌滤纸吸十水分后，置于PDA培养基平板上，每Ⅲ放置3~4块，培养方法同5.2.2.1。
6鉴定特征
6.1培养性状
在PDA培养基上菌丝大量生长，开始灰自色，随时间逐渐变为紫色，培养6d～10d后菌落中产生分生孢子，在PDA上菌落边缘不整齐，生长较缓慢，生长速度约3.9nm/d气生菌丝纤细。（参见图C.1）6.2
形态特征
有性态：了囊壳表牛，青紫色，倒卵形，有疣状突起，表面粗糙。子囊梭形，开裂，内有子囊抱子8个：直径250μm~390um（平均310um），有侧丝。子囊壳在3%的氢氧化钾溶液中不变色，在100%的乳酸中变成红色了囊壳由分区明显的内外两层构成，外层厚18μm~39μ加（平均30.6m），内层厚4.4um~5.9μm（平均4.9μm），外层细胞大，内层细胞小。子囊孢子从孢子角溢出，光滑，透明，椭圆形或倒卵形，两端钝圆0～1个分隔：一股为1个分隔：分隔处稍缩，子囊孢子大小（28m～32m）×（3um4.5um）（平均30.4um×4.2m）。子囊壳和子囊孢子的大小是鉴定甘熹调菱病菌的重要特征（参见图C.2）.甘燕调萎病菌与近似种的区别参见附录D无性态：大型分生孢子（38um68μm）×（4.0#m~5.0mm），细长，镶刀形，壁薄.3~4个分隔，通常3个分隔，有时产生蓝色或黑色的菌核。小型分生孢子（9μm~12μm）×（3.0um~3.5um），卵形，无隔，单胞。小分生孢子在单分生孢子梗或聚分生孢子梗上假头状大量产生（参见图C.3）。2
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结果判定
病原菌培养性状和形态特征衍合6.1及6.2中描述。可鉴定为甘燕调萎病菌8
样品保存与处理
SN/T3676—2013
样品经登记和经于人签字后要善保存。对检出甘蔗凋萎病菌的样品应保存于4℃冰箱中，以备复核。该类样品保存期满后须经高压灭菌后方可处理。9
菌株保存与处理
从检测样品中分离并鉴定为甘蔗调菱病菌的菌株，应妥善保存。将菌株接种于PDA培养基斜面
上，存活后置于4℃～8℃黑暗条件下保存，定期（3个月）转接，以防止病菌死亡，至少保存6个月，必要时用病菌分生孢子作冻干菌种保存。保存期满后高压灭活处理。10
结果记录与资料保存
实验记录包括样品的来源、种类，时间，实验的时间，地点方法和结果等，并有实验人员和审核人员签字。
KAoNiKAca
SN/T3676—2013
A.1病菌名称
中文名称：廿蔗调萎菱病菌
英文名称：sugarcanetoprot
pineapple cye rot
pine canker pitch
maize scedling blight
sugarcanc top rot
maizewilt
pineapple fruit rot
附录A
（资料性附录）
甘蔗凋萎病菌其他信息
flowermalformationof mango
异名：Gihberellafujikuroivar.subglutinansEdwardsGibberella subglutinans Nelson et alFusarium sacchari var.elongatumFusariumsaccharivar.subglutinans(Wollenw.&.Reinking)NirenbergFusarium moniliforme var.subglutinans Wollenw.&ReinkingFusarium subglutinans Nelson et al.Cephalosporium sacchari E.J.Butler etHafizKhanGibberella moniliforme var.subglutinans Woll.&Rei.A.2
2症状特征
甘蔗调萎病菌在发病初期，通常发生在甘蔗下部，症状一般不明显，当甘蔗长至一半高度时，发病严重的甘蔗死亡才引起重视。病害造成甘煎生长缓慢，植株矮化，不分藥，产生大小不等的病斑，病害迅速在日间传播开来，到收获时，甘蔗枯萎，先是叶片如缺水般下枯，接着是蔗茎变空变轻。将枯萎的燕茎开，发现内部有特征性的变色。弥漫性的紫色或暗红色代替了被白色区域横向扩展打破的亮红色斑块和条纹，在病害早期变色的特点是该病害区别于其他病害的显著特征。在老甘蔗中，红色几乎消失，取而代之的是土褐色。在甘蔗空腔内，经常发现蓬松的灰色霉层。A.3
3寄主范围
甘蔗Saccharum.officinarum、高粱Sorghumbicolor.兰花Cymbidiumspp..玉米Zeamays、菠萝Ananascomosus、芒果Mangiferaindica、松树Pinusspp.等。A.4地理分布
欧洲：德国、波兰，奥地利、匈牙利、意人利。KAoNiKAca
美洲：墨西哥、美国、阿根廷、巴西、古巴、洪都拉斯非洲：马里、毛里求斯、南非。亚洲：孟加拉国、印度、日本，阿拉伯联合酋长国、中国台湾大洋洲澳大利亚、新西兰。
A.5传播途径
SN/T3676—2013
病菌依靠带菌种子、种苗和病残体进行远距离传播。病菌产生的大量孢子是初侵染源。病菌通常通过伤口、蔗茎节上的芽眼或种植时的切口进行侵染，造成种植时大量嫩株在前3个月内枯萎。生长后期，病菌通过伤口侵染
TTKAOiKAca
SN/T3676—2013
B.1马铃薯培养基（PDA)
附录B
（资料性附录）
培养基配制方法
马铃薯去皮后洗净，切成小块.称取200g，蒸馏水中煮30min，用4层纱布过滤，加入10g~20g燕糖、17g~-20g琼脂，加热使之完全溶解.蒸水定B.2胡萝卜培养基(CA)
121℃高压灭菌15ming
l000mL
新鲜胡萝下洗净，切碎，称取200g，加蒸馏水500mL，用组织捣碎机捣碎，用4层纱布过滤去渣，加人15g~20g琼脂，加热使之完全溶解，蒸馏水定容至1000mL.121℃高压灭菌15min。B.3麝香石竹叶片培养基（CLA）取新鲜的无杀真菌剂和杀虫剂污染的爵香石竹叶片切成5mm8mm，-70C冷冻干燥3h~4h
直到叶片变脆，将干燥后的叶片放在铝制或聚碳酸酯的容器中，用伽马辐照进行灭菌。称取20g琼脂，蒸馏水定容至1000mL.加热使之完全溶解，121℃高压灭菌15min。按照每2mL加一片干燥的叶片的标准将叶片加人培养基中，一般90cm的培养血中加叶片9～10片。B.4V8-汁培养基
5mlLV8-汁，碳酸钙0.02g.琼脂2g，蒸馏水定容至100ml,121℃高压灭菌15min。6
irkAoNiKAca
注：引自IshwarDaselal.2000
附录C
（资料性附录）
甘蔗调萎病菌形态特征及症状表现图C.1PDA培养基上菌落培养性状SN/T3676—2013
图C.2甘蔗凋菱病菌Gibberella sacchari子囊壳、子囊和子囊孢子在胡萝卜培养基上形态特征SN/T3676-—2013
说明：
了囊壳，标尺一20cum；
子囊壳横切面.3标尺-50um+4标尺-25um；子毫，5标尺-50um，6标尺-25Mm：子囊他子，标尺=25m，
注：引白J.F.Leslie+etal.2005.图C.2（续）
说明：
大分生孢子：
小分牛生孢了：
麝香石竹培养基上分生他子梗上的小分生孢子，标尺一25μI1。注：引自J.F.Lesliesetal,2005图C.3甘蔗凋萎病菌Fusariumsacchari形态特征8
附录D
（资料性附录）
SN/T3676—2013
甘蔗凋萎病菌Gibberellasacchari与近似种子囊壳、子囊孢子的区别表D.1
病原菌
Gibberella sacchari
Gibberella fujikuroi
Gibberella intermedia
Gibberella thapsina
Gibberella monilifnrmis
Gibherela sbglutinans
Gibberella circinata
Gibberella nygamai
甘蔗凋萎病菌与近似种子囊壳、子囊孢子的区别表了囊壳大小（直径平均值）/um
子囊孢子大小（平均值）/um
30.4μmX4.2μm
12.5μm×4.7μm
14.6μm×4.8μmbZxz.net
17.0μmX8.0μm
17.5μmX4.8μm
19.6μmX5.9μm
12.7μmX5.2μm
13.9μmX5.3μm
SN/T3676-2013
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