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SN/T 4634-2016

基本信息

标准号: SN/T 4634-2016

中文名称:茶黄蓟马检疫鉴定方法

标准类别:商检行业标准(SN)

标准状态:现行

出版语种:简体中文

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相关标签: 蓟马 检疫 鉴定 方法

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标准简介

SN/T 4634-2016.Detection and identification of Scirtothrips dorsalis Hood.
1范围
SN/T 4634规定了茶黄蓟马的检疫和鉴定方法。
SN/T 4634适用于进出境植物及其产品传带的茶黄蓟马的检疫和鉴定。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
注:其他蓟马分类学常见术语图参见附录A。
2.1过渐变态hyperpaurometabola
为不全变态中特殊的一类,其若虫在变为成虫前要经过一个不食又少动的类似蛹的虫龄。
2.2叉状感觉锥forked sense cones
位于触角第III、IV节上、呈叉状的感觉器官。
2.3后单眼鬃postocular setae
位于单眼三角区后侧的1对刚毛。
3茶黄蓟马基本信息
学名:Scirtothrips dorsalis Hoods,1919
英文名:Chilli thrips
异名:Ana phothrips andreae Karny; Ana phothrips fragariae Giard; Heliothrips m inutissimus
Bagnall Neoph ysopus fragariae Girault; Scirtothrips andreae ( Karny); Scirtothrips fragariae
(Grault) ;Scirtothrips minutissimus ( Bagnall); Scirtothrips padmae Ramakrishna; Scirtothrips dor-salis var. padmae Ramakrishna.
分类地位:属缨翅目(Thysanoptera)、蓟马科(Thripidae)、硬蓟马属(Scirtothrips)。为过渐变态昆虫,一生要经过卵、若虫和成虫三个阶段。该属内在形态上与茶黄蓟马近似的种主要有S.aurantii,s.citri ,S.nermis ,S.longi pennis ,S .mangiferae ,S.oligochaetus。
茶黄蓟马的其他信息参见附录B。

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标准内容

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4634—2016
茶黄蓟马检疫鉴定方法
Detection and identification of Scirtothrips dorsalis Hood2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4634—2016
本标准起草单位:中华人民共和国江西出人境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中华人民共和国新疆出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所、江西农业大学。本标准主要起草人:黄丽莉、高渊、王、祝建新、阙海勇、陈乃中、车飞、薛芳森、何海敏1范围
茶黄蓟马检疫鉴定方法
本标准规定了茶黄蓟马的检疫和鉴定方法本标准适用于进出境植物及其产品传带的茶黄萄马的检疫和鉴定2术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。注:其他蓟马分类学常见术语图参见附录A。2.1
过渐变态hyperpaurometabola
SN/T4634—2016
为不全变态中特殊的一类,其若虫在变为成虫前要经过一个不食又少动的类似蛹的虫龄。2.2
forked sense cones
叉状感觉锥
位于触角第Ⅲ、IV节上、呈叉状的感觉器官。2.3
后单眼業
postocularsetae
位于单眼三角区后侧的1对刚毛。3茶黄蓟马基本信息
学名:ScirtothripsdorsalisHoods,1919英文名:Chillithrips
异名:Anaphothrips andreae Karny;Anaphothrips fragariae Giard;Heliothrips minutissimusBagnall Neophysopus fragariae Girault: Scirtothrips andreae (Karny;Scirtothrips fragariae(Grault);Scirtothrips minutissimus(Bagnall),Scirtothrips padmae Ramakrishna;Scirtothrips dorsalis var.padmae Ramakrishna.分类地位:属缕翅目(Thysanoptera)、蓟马科(Thripidae)、硬蓟马属(Scirtothrips)。为过渐变态昆虫,一生要经过卵、若虫和成虫三个阶段。该属内在形态上与茶黄蓟马近似的种主要有S.aurantii,S.citri,S.nermis,S.longipennis,S.mangiferae.S.oligochaetus茶黄蓟葡马的其他信息参见附录B。4方法原理
依据该虫的危害习性和危害状进行检测,收集样本。分类鉴定以成虫的形态特征作为鉴定依据,以PCR特异性扩增片段作为鉴定的参考依据。1
SN/T4634—2016
5仪器、用具及试剂
仪器设备
体视显微镜、生物显微镜、扫描电镜、PCR仪、电泳仪、凝胶成像、超低温冰箱。5.2用具
手持放大镜、小镊子、解剖针、剪刀、白瓷盘、脱脂棉、载玻片、盖玻片、吸管、小毛笔、玻璃瓶、酒精灯、小玻瓶。
5.3试剂
5%氢氧化钾、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、无水乙醇、蒸馏水、二甲苯、丁香油、中性树胶、萄马保存液(75%乙醇:冰醋酸=20:1)Hoyer氏液(阿拉伯胶30g,水合氯醛200g,甘油20g,蒸馏水50mL,混合加热,待充分融合后再过滤)、六甲基二硅胺烷(HMDS)。Tris(三羟甲基氨基甲烷)、EDTA(乙二胺四乙酸)、NaCI、SDS(十二烷基硫酸钠)、蛋白酶K、10×PCR反应缓冲液、MgCl、PCR引物sdi-16F/sdi-20R、Tag聚合酶、dNTP、DNAMarker、溴化乙锭(EB)。
6现场检查
检查切花、切枝时,先在地上或实验台上置一白瓷盘,最好再铺上一层深色纸,然后倒持切花、切枝轻轻抖动,蓟马受惊后会从切花,切枝掉落到盘上,将盘上的蓟马用蘸有75%乙醇的小毛笔收集到盛有蓟马保存液的透明小瓶内。
检查植株时,应注意检查叶面和叶背、枝条、幼果、花萼的隐蔽处,仔细观察是否有萄马为害状,其中是否隐藏该虫;尤其要注意嫩枝上的弯曲叶片、呈银化或褐斑、线性增厚的叶片、花萼和幼果的果蒂等部分。
检查果实时,观察果实表面是否有灰色至黑色的疤痕且成弯曲的、不规则的、交错的条纹状;仔细检查果实的表面,尤其是果柄处、盛放果实的包装内壁、夹缝处,如发现肉眼可见两头尖、行动迅速、体长约0.6mm~1mm的昆虫,将其放入保存液中在25℃~30℃下,卵历期5d~8d,可在室温下将样品植株插于盛装适量水的容器内保湿,冬天可在25℃植物生长箱内放置8d,之后检查是否有若虫。或直接将可能有虫卵的叶片剪下,浸泡于75%乙醇中,待叶片变色后,置体视显微镜下检查。7玻片标本制作
茶黄葡马成虫的玻片标本参照附录C进行制备。8鉴定
硬蓟马属(ScirtothripsShull)成虫的主要形态特征(属种的检索表及与相似种的区别参见附录D、附录E)8.1.1体长
雌虫0.666mm~1.125mm,雄虫0.405mm~0.882mm。2
-TTKAONIKACa
8.1.2头部
SN/T4634—2016
头宽大于长:复眼突出,小眼面规则具毛;单眼3个,呈三角形排列,有2对前单眼累,及1对单眼间景及眼后累;触角8节,第Ⅲ节具菌状梗,第Ⅲ~IV节具有叉状感觉锥,分别分布在背、腹面,第Ⅱ节具微毛纹;口锥圆短至长尖不等,但不超过前胸背板;下颚须3节,下唇须2节。8.1.3胸部
前胸宽大于长,常有细密横纹,具交叉刚毛,不同种类毛序数量与位置不同,后缘具刚毛,第2对比第1或3对粗长:中胸呈六面体,密布横纹,具横向走向,每面均具一粗长累:后胸背板具多角形横网纹。前翅具两条翅脉,前脉累不连续,缘毛直或波形。谢节2节。8.1.4腹部
腹第工二砸节背板两侧有密排微毛,中间1对刚毛的大小与位置不同:腹片没有附毛,但在两边具微毛;背部第V具一完整的后缘梳;雄虫腹部第IX节两侧有时有1对镰形抱钳;腹片无腺域。8.2茶黄蓟马成虫的形态特征(参见附录F)8.2.1体型体色
雌虫体长约0.7mm~1mm,体黄色,单眼月晕红色,背腹部第Ⅲ~~节具暗色前脊线及一明显暗色中带。触角第1节灰白色,第Ⅱ~训节浅棕色:主要繁浅棕色。前翅色微暗但近基部后缘色深。羅虫体结构与雌虫相似,但体形较瘦小,约为0.7mm,腹各节暗斑与前缘线不明显8.2.2头部
头宽大于长,具明显的细横纹线,单眼间繁三对,后单眼繁即第Ⅲ对单眼刚毛位于两后单眼内缘,长度约与头部两对后单眼等长。触角8节,第Ⅲ、IV节具粗义状感觉锥8.2.3胸部
前胸背板密布细横纹,具约20根,均较短且长度约相等;前缘2对:后缘3对,中央第Ⅱ对更粗,约为第与川对禁长的1.5倍:中胸背板盾片布满横纹,后胸背板中央网纹纵间走尚,无钟状感觉器。中、后胸腹方叉状骨皆具有刺突。前翅前脉上具3支相距较远的繁,后缘缨毛直形。8.2.4腹部
腹部第Ⅱ~И节背片中对禁微小,间距小(间距通常小于禁长)。第Ⅱ~VⅢ节背片两侧有明显紧密微毛,侧微毛区中具3支票及2支后缘禁,腹部第证写恤节后缘皆具长梳毛,第训节背板中对刚毛长于亚中对刚毛,雄虫第I节背板刚毛长,8.3PCR检测
茶黄蓟马若虫和成虫PCR检测方法见附录G。9结果评定
分类鉴定以成虫的形态特征作为鉴定依据,以PCR特异性扩增片段作为鉴定的参考依据。镜检成虫形态特征符合8.1和8.2描述,可判定为茶黄马。3
-rAoNirKAca
SN/T4634—2016
若虫或成虫经PCR检测,在135bP处有特异性条带,阴性对照无条带产生,阳性对照亦产生135bp条带的,可判定该马为茶黄蓟马。标本保存
将茶黄蓟马及重要的为害状标本妥善保存。根据害虫的虫态,若虫用乙醇-甘油保存液保存;成虫制作成玻片标本;鉴定为茶黄蓟马的基因组DNA置于一20℃冰箱内,注明编号、中文名称、学名、科别、产地、货物名称、日期,经手人签字后妥善保存6个月以上。-niAoNiKAca
附录A
(资料性附录)
萄马科形态特征与分类术语
蓟马科形态特征与分类术语见图A1。节芦
前角紫
后缘酶
前脉端蔡
后缘缨毛
前缘缨毛
眉脚器
中离质片
后胸质用
前缘媒
前脉繁
后脉巢
需髓片
微弯梳
后缘机
感觉锥
SN/T4634-2016
单眼侧黎
下题须
下唇须
中胸内叉骨刺
后胸内叉骨
侧腹片
产卵器
图A.1蓟马科形态特征与分类术语-TTKAONiKAca
SN/T4634—2016
B.1寄主
附录B
(资料性附录)
茶黄蓟马的寄主及地理分布
已记载的寄主有40科100多种植物,包括柑橘、茶、葡萄、苹果、芒果、草荐、花生、玫瑰、非洲菊、大理花、牡丹、棉花、苦楝、银杏、番荔枝、玉米、青椒、山楂、百香果、柿、梨、芦笋等。B.2
地理分布
亚洲:孟加拉国、文莱、中国(海南、广东、广西、云南、浙江、福建、台湾、香港、江西)、印度、印度尼西亚、日本、韩国、马米西亚、缅甸、巴基斯坦、菲律宾、斯里兰卡、泰国、以色列,非洲:南非、科特迪瓦。
北美洲:美国、加勒比海地区(牙买加、圣文森特、圣卢西亚、巴巴多斯、特立尼达)。南美洲:委内瑞拉。
大洋洲:澳大利亚、巴布亚新几内亚、所罗门群岛。生物学特性及危害
茶黄蓟马发育起点温度约为9.7℃,在22℃30℃下卵期、若虫期、成虫期分别为3.8d~8d、7.4d~15d、16.9d~26.9d;茶黄葡马在江西南昌一年发生8代~10代,以成虫和极少部分若虫越冬,3月中旬,越冬若虫开始羽化,4月上旬越冬成虫开始产卵,中旬始见初孵若虫,10月下旬出现的成虫和少数若虫进人越冬。为害症状包括叶片表面银化;叶片组织线性增厚;叶片与果实褐色虫粪斑:果实灰至黑色疤,通常围绕果柄形成一圈明显的疤状组织;果实变形,叶片早衰与脱落等。B.4传播途径
茶黄蓟马成若虫主要取食植物的幼嫩组织,雌成虫产卵在植物的幼嫩组织中,因此卵、成若虫均可通过幼苗及具幼芽的植物组织传带进人茶黄蓟马通常在植物叶片、花和果实上的花萼上化蛹,也可在枯枝落叶层与土壤中化蛹,因此蛹则可通过叶片、花和果实上的花萼及土壤传带。6
-TIKAONIKAca
C.1临时性玻片标本
附录C
(资料性附录)
茶黄蓟马成虫玻片标本制作方法SN/T4634—2016
将浸泡标本置于载玻片上,用Hoyer氏液封盖,置人40℃~50℃恒温箱内烘烤2d3d,使其身体略透明即可用作鉴定标本。
2永久性玻片标本
将浸泡标本渐至85%乙醇、95%乙醇、100%乙醇中脱水,每浓度乙醇中约经20min,在载玻片上滴上丁香油数滴,放人标本,用小针对翅、触角及足等整姿,用吸水纸吸干丁香油,然后滴上数滴中性树胶,盖上盖玻片,置人40℃~50℃恒温箱内烘烤2d~3d。C.3
扫描电镜标本制作
将浸泡的标本转移至50%、70%、95%、100%乙醇中脱水,每浓度停留30min.在100%乙醇中脱水2次;后将标本停留在100%乙醇中过夜;第2天将标本转移至50%HMDS乙醇溶液、100%HIMDS中,每浓度停留30min;完成后将标本取出,喷金粉或钯粉镀衣或直接粘于导电胶上待用。SN/T4634—2016
附录D
(资料性附录)
硬蓟马属部分成虫检索表
1腹板第ⅢИ节有多列明显微毛覆盖中部区域,至少覆盖后半部腹板多列明显微毛仅覆盖后部区域,很少延仲至边缘SI的中线,2前翅后缘毛呈波状弯曲,腹板第IV~V节几乎全部覆盖微毛;背板第IV节后中部很少或无微毛:单眼繁Ⅲ位于后单眼前缘之间相切;雄虫后足腿节具6根粗组成的梳:雄虫背板第IV节具1对镰状抱钳S.aurantii
前翅后缘毛呈直线形腹板第IV节仅后半部覆盖微毛:背板第IV节后中部有许多微毛;单眼Ⅲ位于后单眼之间,雄虫后足腿节无粗:雄虫背板第IV节无抱钳3腹部背板中部具暗纹,背板前脊缘黑色,后微毛区具3根费腹部背板中部和前缘脊无暗纹,后微毛区具4-5根4前翅后缘毛均为直线形:
前翅后缘毛均为波曲形,至少翅中部毛皇波3
.S.dorsalis
S.oligochaets
5背板后部微毛区中部具深色纹:前翅具深色纹;前胸背板后缘S2长度是S1的两倍;背板微毛区具3根..
,S.henyensis
背板除前缘脊外均不具深色纹,前翘浅色:前胸背板后缘最费S2长度不超过S1的1.7倍背板微毛区具45根禁
6后缘繁长度不超过前胸背板繁的0.3;单眼差Ⅲ长度不超过单个单眼的纵宽;雄虫第IV节具1对镰状抱钳
.S.fuller
后缘S2长度不超过
前胸背板禁的0.5,单眼累Ⅲ长度为单个单眼纵宽的2倍;雄虫第IV节无镰状抱钳
7前胸背板后缘禁S2S3长度不超过前胸背板中部长度的
前胸背板无景长度超过前胸背板中部长度前翅第二条脉具5
13根禁(很少4根):
背板第训
前第二条脉具2~3根繁(利
靠近前缘处无微毛
根:背板第妞节
中部靠
近前缘处具多列微毛·
9腹部背板浅色,前缘脊也为浅色;前翅浅色,第腹部背板浅棕色,前缘脊为深色:前翅深色,第体色主要为棕色,前翅几乎为深色10
体色大部为黄色.前翅浅色或由两色组成·条脉具
S.inermis
S.spinosus
一6根后胸背板具延伸的网状纹….…S.africanus
条脉具7~13根繁,后胸背板中部几乎是直的……….S.zuluensis
S.mugambii
单眼繁Ⅲ位于单眼三角区前缘;前胸背板后缘累S2约为前胸背板的0.4(体色浅,头的前部为棕色,11
前翅大部分为深色)
.S.longipennis
单眼累Ⅲ位于单眼三角区间,仅前于后单眼前缘之间:前胸背板后缘累S2不超过前胸背板的0.31212背板具中部深色区域;前翅尖端浅色但中部1/3处深色,爪深色:腹板微毛延伸至边缘繁S1的中部..S.combreti
背板浅色无中部深色区域;前翅与爪均为浅色;腹板微毛不延伸至边缘鬃S1的中部1313背板前缘脊深色,后微毛区具3支;背板第节中部无微毛;雄虫后腿节具6根繁组成的梳状毛.S.dodonaeae
背板前缘脊浅色,后微毛区具4支黎;背板第IV节中部具微毛;雄虫后腿节无禁S.mangiferae8
附录E
(资料性附录)
茶黄蓟马及部分相似种分类特征表茶黄蓟马及部分相似种分类特征表见表E.1。表E.1茶黄蓟马及部分相似种分类特征表序号
分类特征
腹背片是否具有深色
背板是否具暗前脊线
腹片上是否具暗前
第3对刚毛的位置,
A:位于后单眼之间,
B:位于后单眼之前,
C:位于前单眼后面,
D:位于前单眼前面
复眼后聚的数量
前胸后缘素的数量
前胸后缘聚聚Ⅱ的长
度/μm
中胸中乐的位置
A:前缘前面:B:前缘
后面。
前翅前缘暴的数最
前翅中攀的数量
前翅缨毛的形状。弯
曲(+)直(一)
腹部背片微毛区鬃的
腹部背片第亚节前内
侧是否具微毛
腹部背片第区节中部
是否具微毛
腹板上微毛的分布。
A:分布于后1/3;B:分
布于后2/3;C,全覆盖
雄虫背片第X节后角
对镀形拖钳
S.dorsatisbzxz.net
S.auraniiS.citri
S.lonribennt
SN/T4634—2016
m8n081
S.oligochaetus
SN/T4634—2016
茶黄蓟马形态特征见图F.1。
说明:
摊虫:
中胸及前胸背板
前胸、中胸及后胸背板;
一触角;
头部;
前翅;
第V~训节腹节:
第И、Ⅱ、亚节腹片
附录F
(资料性附录)
茶黄蓟马形态特征
图F.1茶黄萄马ScirtothripsdorsulisHood形态特征图(b、c、d、e、f、g、h仿Hoddle2012)10
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