SN/T 4653-2016.Determination of carbamate residues in Chinese herbal medicine for export-
LC-MS/MS method.
1范围
SN/T 4653规定了中药材中灭多威、异丙威、西维因、仲丁威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威、灭虫威、3-羟基-克百威和抗蚜威残留量的液相色谱质谱/质谱测定方法。
SN/T 4653适用于出口济银花、苏叶、杭菊、甘草、山楂、白芷、黄连、枸杞、人参、红花中灭多威、异丙威、西维因、仲丁威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威、灭虫威、3-羟基-克百威和抗蚜威残留量的确证和定量测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分 析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
采用乙腈提取,ASE萃取试样中残留的氨基甲酸酯类农药，提取液经石墨化炭黑/氨基固相萃取柱净化,液相色谱质谱/质谱测定和确证,外标法定量。
4试剂材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1乙 腈:色谱纯。
4.2 甲苯:色谱纯。
4.3甲酸: 色谱纯。
4.4乙 酸铵:优级纯。
4.5海砂。
4.65mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸):准确称取0.385g乙酸铵,加人1mL甲酸,用水溶解并转移至1000mL容量瓶中,定容至刻度。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4653—2016
出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法
液相色谱-质谱/质谱法
Determination of carbamate residues in Chinese herbal medicine for export-LC-MS/MSmethod
2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法SN/T4653—2016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：(010)68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印制1/16
开本880×1230
2018年1月第一版
印张1.75
字数50千字
2018年1月第一次印刷
印数1-500
书号：155066：2-32353
定价27.00元
本标准按照为GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局本标准主要起草人：杨惠琴、时逸吟、盛永刚、樊彦莉、伊雄海、邓晓军、朱坚SN/T4653—2016
1范围
出口中药材中氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法SN/T4653-2016
本标准规定了中药材中灭多威、异丙威、西维因、仲工威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威灭虫威、3-羟基-克百威和抗蚜威残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于出口济银花、苏叶、杭菊、甘草、山楂、白芷、黄连、枸杞、人参、红花中灭多威、异丙威、西维因、仲丁威、猛杀威、残杀威、克百威、恶虫威、灭蚜威、火虫威、3羟基克百威和抗蚜威残留量的确证和定量测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
采用乙睛提取，ASE萃取试样中残留的氨基甲酸酯类农药，提取液经石墨化炭黑/氨基固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。4试剂材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1乙：色谱纯。
4.2甲苯：色谱纯。
4.3中酸：色谱纯。
乙酸铵：优级纯。
4.5海砂。
4.65mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）：准确称取0.385g乙酸铵，加1mL甲酸，用水溶解并转移至1000mL容量瓶中，定容至刻度。4.7乙腈溶液（含0.1%甲酸）：1mL甲酸溶解于乙腈中，转移至1000mL容量瓶，定容至刻度。4.8乙腈-甲苯混合液（3+1，体积比）：量取100mL甲苯，加入300mL乙睛，混匀备用。4.9农药标准物质：灭多威methomyl.CAS号：16752-77-5；异丙威isoprocarb，CAS号：2631-40-5；西维因carbaryl，CAS号：63-25-2；仲丁威fenobucarb，CAS号：3766-81-2：猛杀威promecarb，CAS号：2631-37-0；残杀威Propoxur，CAS号：114-26-1：克百威carbofuran,CAS号：1563-66-2恶虫威bendio-carb,CAS号：22781-23-3；灭蚜威ethionfencarb，CAS号：29973-13-5；灭虫威methiocarb，CAS号：2032-65-73-羟基-克百威carbofuran-3-hydroxy，CAS号：16655-82-6；抗蚜威pirimicarb，CAS号：23103-98-2纯度均大于98%。
KAONKAca
SN/T4653—2016
4.10标准储备液的配制：分别准确称取适量的标准物质（4.9），用乙睛配制成浓度为1.0mg/ml.的标准储备溶液。该溶液在一18℃冰箱中保存，有效期为1个月。4.11混合标准中间溶液的配制：分别准确移取一定体积的标准储备液（4.10），用乙睛稀释成10.0μg/mL的混合标准中间工作液.现配现用4.12混合标准工作溶液的配制：分别移取适量混合标准中间工作溶液（4.11），用空白样品基质溶液配成适当浓度的混合标准工作溶液，现用现配。4.13石墨化炭黑/氨基固相萃取柱：6mL,5c0mg或相当者。微孔滤膜：0.45μm，有机滤膜。4.14
仪器与设备
液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子（ESI）加速溶剂萃取仪：配有33mL萃取池，或相当者。电子天平：感量分别为0.01g0.001g。固相萃取装置。
氮吹仪。
涡漩混匀器。
旋转蒸发仪。
研体。
圆底烧瓶：250mL。
聚四氟乙烯试管：50mL。
刻度玻璃试管：15mL
试样的制备与保存
6.1试样制备
取代表性样品500g，全部粉碎后混匀，均分成两份试样，装人洁净的容器内，密封并标明标记。6.2试样保存
试样于常温状态下保存
注：在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7分析步骤
7.1提取
称取约2.0g样品（精确至0.01g）丁聚四氟乙烯试管中，加人适量的海砂后转移人研体拌匀后，装入33mL加速溶剂萃取池，用乙睛作为提取溶剂，按设定的提取程序运行：温度80℃，压强1500psi，加热5min，静态萃取5min，循环1次。然后用池体积60%的乙睛冲洗萃取池，并用氮气吹扫60s。提取完成后，将提取液收集于圆底烧瓶中，35℃水浴中旋转蒸发至1mlL。注：上述所列加速溶剂萃取仪参数是在ASE200上完成的，仅供参考。7.2净化
用10mL乙睛甲苯混合溶液（4.8）活化石墨化碳黑/氨基小柱，弃大淋洗液，将上述的提取液2
KAoNiKca
SN/T4653—2016
(7.1）转移至小柱中过柱，并用10mL乙睛-甲苯混合溶液（4.8）洗脱（在整个活化、上样和洗脱过程中应避免SPE柱干凋）。收集洗脱液于15mL刻度试管中并于40℃下氮吹浓缩至近干，准确加入5.0mL5mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）（4.6)溶解残渣，过0.45um有机滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪检测。
7.3测定
7.3.1液相色谱条件
液相色谱条件如下：
色谱柱：Cls色谱柱：长50mm，内径4.6mm.粒径1.8um，或相当者：b）
柱温：30℃
流速：0.4mL/min；
进样量：20=L；
流动相：A：乙（含0.1%甲酸），B：5mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）；梯度洗脱程序见e
表1，
表1流动相、流速及梯度洗脱条件时间
质谱条件
质谱条件如下：
电离方式：电喷雾电离（ESI)：a)
b）扫描方式：正离子模式：
质谱扫描方式：多反应监测（MRM）；c
其他参考质谱条件见附录A。
液相色谱-质谱/质谱测定
7.3.3.1定性测定
流动相A%
流动相B%
在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在士2.5%之内；每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母离子和两个子离子，且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离了丰度
允许的最大偏差
>20%~50%
>10%～20%
上50%
-TKAONTKAca
SN/T4653—2016
7.3.3.2定量测定
在仪器最佳工作条件下，对混合基质标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，混合基质标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。如果含量超过标准曲线范围，应稀释到适合浓度后分析，标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图参见附录B中的图B.1。7.4空自试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行。8结果计算和表述
用色谱处理软件中的外标法绘制标准曲线，试样中各氨基甲酸酯残留量分别按式（1)计算。计算结果需扣除空白值：
cx1000
mx1000xV
式中：
样品中待测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）从标准曲线中得到各氨基甲酸酯标准工作溶液的浓度样品定容体积，单位为毫升（ml）：m
样品称样量，单位为克（g）。
方法的测定低限和回收率
9.1测定低限
本方法的测定低限：0.0125mg
9.2回收率
....( 1)
单位为微克每毫升（μg/mL)；
在三个添加浓度范围内，济银花、苏叶、杭菊、甘草、山山楂、白芷、黄连、枸杞、人参、红花中氨基甲酸酯残留量的回收率数据见附录C中C表。iiKNrKca
质谱条件如下：
电喷雾电压（IS)：4000V；
雾化气压力（GS1）：70Psi；
气帘气压力（CUR）：5Psi；
辅助气流速（GS2）：60Psi：
离子源温度（TEM）：400
附录A
（资料性附录）
质谱条件1
SN/T4653—2016
碰撞电压（CE）、去簇电压（DP）、碰撞室入口电压（EP）、碰撞室出口电压（CXP）见表A.1所示。表A.1
化合物
灭多威
异丙威
西维因
仲丁威
猛杀威
残杀威
克百威
恶虫威
灭蚜威
灭虫威
3-羟基-克百威
抗蚜威
注：“*\为定量离子对。
氨基甲酸酯类及内标碰撞电压、去簇电压参数表母离子（QI
子离子（Q3）
1）非商业性声明：附录表A.1所列参数是在API4000质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业日的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。5
-TrKAoNiKAca
SN/T4653—2016
附录B
（资料性附录）
标准的多反应监测(MRM）色谱图灭多威Methomyl163.1—88.0
：0.0年
异丙威Isoprocaurb194.2—95.16.92
Time,min
西维因Carbaryl202.3—117.2
Timemin
仲丁威Fenobucarb 208.1—95.17.26
猛杀威Promecarb208.1
残杀威Propoxur210.1111.1
克百威Carbofuran222.3
虫威Bendiocarb224.1—167.2
Time,min
灭蚜威Ethiofencarb226.1
灭虫威Mecthiocarb226.2—169.17.26
Timemin
3羟基-克百威30H-Carbofuran238.2—220.35.37
Timemin
抗蚜威Pirimicarb239.2195.2
灭多威Methomy1163.1—106
异丙威Isoprocarb194.2—137.26.92
Timemin
西维因Carbaryl202.3—145.2
Timemin
仲丁威Fenobucarb208.1—152.17.26
猛杀威Promecarb208.1
残杀威Propoxur210.1—168.1
克百威Carbofuran222.3—123.26.53
Time,min
恶虫威Bendiocarb224.1—109.1640
火蚜威Ethiofencarb226.1—107.16.75
灭虫威Methiocarb226.2—121.17.26
3羟基-克百威3oH-Carbofuran238.2—181.35.37
抗蚜威Pirimicarb 239.2—181.15.59
氨基甲酸酯（10.0μg/mL）标准溶液的多反应监测（MRM）图10
化合物
添加水平
μg/kg
回收率范围
灭多威
猛杀威
86.6~-103
77.0~-100.9
80.6~~91.1
82.1--89.9
灭多威
75.4-89.9
80.2-~99.7
猛杀威
76.0~95.5
灭蚜威
77.3~87.6
79.0~106.8
85.9~112.1
灭多威
76.8.0~99.8
猛杀威
附录℃
（资料性附录）
添加回收结果
12种氨基甲酸酯不同添加水平回收率数据添加水平
μg/kg
回收率范
异丙威
76.3~96.7
77.9~99.1
残杀威
75.9~96.9
80.1~99.9
77.9~103.4
灭虫威
77.1~89.4
80.5~101.2
83.7108.4
异丙威
79.3~89.9
80.3121.4
81.7~106.4
残杀威
76.9~98.7
80.1~100.9
87.9~112.1
灭虫威
76.2~-86.7
80.7100.9
87.9~99.9
异丙威
80.3--98.3
77.9~99.6
残杀威
76.3~96.5
添加水平
回收率范围
西维因
76.6~99.1
克百威
76.6~98.1
75.7~103.5
3-羟基-克百威
77.3~89.4
76.6~-98.8
81.1-105.7
西维因
82.3-99.8
76.9--89.2
79.7~102.8
克百威
75.6~99.6
86.6~99.9
83.6~105.1
3-羟基-克百威
86.6~112.5
85.6~-93.9
西维因
81.6-99.7
85.6~-102.3
克百威
75.6~-99.6
SN/T4653—2016
添加水平
μg/kg
回收率范围
仲丁威
76.7~-99.6
77.9~-102
77.8--110.2
恶虫威
86.1~110.5
80.9100.9
抗蚜威
76.3~99.9
81.6~-113.1
82.7~99.7
仲丁威
81.4-99.4
79.4~-106.3
84.6--99.8
恶虫威
76.7-96.3
81.9115.4
83.4102.9
抗蚜威
75.4~-96.5
77.9~103.7
81.6~114.1
仲丁威
80.9~-96.7
81.8~-113.4
恶虫威
76.2~-107
SN/T4653—2016
化合物
添加水平
回收率范国
猛杀威
82.0~99.3
灭蚜威
79.9~120.2
灭多威
85.0~102.3
81.9112.4
猛杀威
86.6~-111.2
85.6~113.4
灭蚜威
81.0111.1
85.0-~99.7
86.7~112.6
灭多威
78.6~95.6
猛杀威
77.2~-96.6
84.6105.2
76.2~-104.3
灭蚜威
添加水平wwW.bzxz.Net
表C.1（续）
回收率范围
残杀威
灭虫威
77.9~99.1
异丙威
80.3--100.5
87.9~1201
残杀威
77.9~99.9
76.3-96.7
77.9101.5
异丙内威
77.8m95.7
残杀威
76.8--91.7
82.4~111.9
83.9~109.5
灭虫威
76.3~96.7
80.3--100
77.9~99.1
添加水平
1ig/kg
回收率范围
克百威
83.6~109.4
75.6~99.7
3羟基克百威
西维因
75.7~99.0
78.6-~99.8
85.6~98.3
克百威
79.6~92.3
克百威
3-羟基
76.6~-103.5
西维因
克百威
75.6~90.1
75.4~99.8
80.0~104.2
3-羟基-克百威
75.6~92.3
添加水平
μag/kg
回收率范围
恶虫威
77.8103.4
抗蚜威
76.7~89.4
83.4~111.4
86.9~103.8
仲丁威
76.7~88.9
77.9~102.6
82.9~111.6
恶虫威
76.7~89.4
80.2~103.5
83.1~102.8
抗蚜威
76.7~100.2
83.6~117.4
85.1~102.5
仲丁威
76.3~96.7
77.9~99.1
恶虫崴
76.3~96.1
80.3~100.4
77.9~99.3
抗蚜威
76.7~89.2
86.1~100.5
77.8~102.2
化合物
添加水平
μg/kg
回收率范围
灭多威
84.1~101.4
76.2~104.9
猛杀威
77.0~100.9
灭蚜威
82.6~101.7
81.9112.4
灭多威
76.6~95.0
79.7~99.4
86.2~-104.5
猛杀威
76.2~-104.3
灭蚜威
78.6~95.6
81.7-107.2
84.3102.9
灭多威
78.1~95.4
77.9107.2
83.1~105.9
猛杀威
80.1-~95.6
79.7-101.9
79.9~102.6
灭蚜威
78.6~98.6
81.6~103.3
79.9106.3
添加水平
μg/kg
表C.1（续）
回收率范围
异丙威
77.8~-95.7
82.9~113.2
75.9~107.1
残杀威
75.9~96.9
77.9~103.4
灭虫威
77.9--99.2
异丙威
82.4~115.1
85.9~98.9
残杀威
75.8~95.2
82.4~112.4
75.6-95.4
82.2--113.2
77.9-105.6
77.8~95.7
82.4113.4
81.9-98.9
残杀威
77.2--98.7
82.4-~115.1
灭虫威
80.6~115.
81.9~98.7
添加水平
μg/kg
回收率范围
西维因
75.6~90.5
75.4~97.8
80.0-104.2
克百威
76.6-98.1
3-羟基-克百威
75.6~89.6
75.6~98.3
西维围
80.8104.3
克百威
3-羟基-克百威
82.6~105.7
西维因
75.6～90.4
75.4~97.8
80.0-~105.3
克百威
78.4-90.6
77.4~97.6
80.0~-104
3-羟基-克百威
75.6*~99.1
75.4~97.8
80.9~~109.1
SN/T4653—2016
添加水平
μg/kg
回收率范围
仲丁威
76.3~96.7
80.2~100.4
77.9~113.4
恶虫威
86.1-~110.5
80.9~100.9
抗蚜威
76.7100.1
77.9-89.4
77.8112.3
仲丁威
76.1~96.8
80.3100.1
77.9~10.7
恶虫威
76.3~96.7
80.5--100.6
77.9--99.9
抗蚜威
76.3~96.7
仲丁威
80.3~92.6
77.9~-101.5
恶虫威
83.0~100.3
85.1~116.7
抗蚜威
80.3-102.9
77.9~-99.1
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。