SN/T 4654-2016
基本信息
标准号： SN/T 4654-2016
中文名称：出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：4679507
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 4654-2016.Determination of clorsulon residue in honey for export-LC-MS/MS method.
1范围
SN/T 4654规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱质谱/质谱测定方法。
SN/T 4654适用于出口蜂蜜中氟舒隆残留量的定量测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液(pH=-9)提取，提取液经Ci8固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证,外标法定量。
4试剂和材料 .
除非另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一-级水。
4.1 甲醇:色谱纯。
4.2乙腈:色谱纯。
4.7 0.1 mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液:称取12.0g三羟甲基氨基甲烷(4.3)和7.35 g氯化钙(4.4),放人1 000 mL烧杯中,加人800 mL水溶解,用盐酸(4.5)调至pH值为9.0,再用水定容至1 000 mL。
4.80.1 mg/mL标准储备溶液:准确称取适量的氯舒隆标准物质(4.6),用甲醇配成0.1 mg/mL的标|准储备溶液。
4.9 1.0 μg/mL标准工作溶液:准确吸取标准储备溶液(4.8)0.1 mL移至10 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。
1范围
SN/T 4654规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱质谱/质谱测定方法。
SN/T 4654适用于出口蜂蜜中氟舒隆残留量的定量测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液(pH=-9)提取，提取液经Ci8固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证,外标法定量。
4试剂和材料 .
除非另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一-级水。
4.1 甲醇:色谱纯。
4.2乙腈:色谱纯。
4.7 0.1 mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲溶液:称取12.0g三羟甲基氨基甲烷(4.3)和7.35 g氯化钙(4.4),放人1 000 mL烧杯中,加人800 mL水溶解,用盐酸(4.5)调至pH值为9.0,再用水定容至1 000 mL。
4.80.1 mg/mL标准储备溶液:准确称取适量的氯舒隆标准物质(4.6),用甲醇配成0.1 mg/mL的标|准储备溶液。
4.9 1.0 μg/mL标准工作溶液:准确吸取标准储备溶液(4.8)0.1 mL移至10 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4654—2016
出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
Determination of clorsulon residue in honey for export-LC-MS/MSmethod
2016-08-23发布
中华人民共和国
玉家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4654—2016
本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局
本标准主要起草人：曹彦忠、贾光群、吴连鹏、王蕾、李响、石玉秋、宋翱。1
1范围
出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
本标准规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于出口蜂蜜中氯舒隆残留量的定量测定和确证2规范性引用文件
SN/T4654—2016
下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注口期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液（pH一9）提取，提取液经C18固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。4试剂和材料
除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水，甲醇：色谱纯。
乙腈：色谱纯。
三羟甲基氨基甲烷（Tris）：优级纯。氯化钙（CaCl·2H,O)：优级纯。盐酸：优级纯。
氯舒隆（Clorsulon）标准物质：C.HCN.O,Sz，CASNo.60200-06-8，纯度≥99%。4.6
4.70.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris)缓冲溶液：称取12.0g三羟甲基氨基甲烷（4.3)和7.35g氯化钙（4.4），放人1000mL烧杯中，加入800mL水溶解，用盐酸（4.5）调至pH值为9.0，再用水定容至1000mLg
4.80.1mg/mL标准储备溶液：准确称取适量的氯舒隆标准物质（4.6），用甲醇配成0.1mg/mL的标准储备溶液。
4.91.0μg/ml.标准工作溶液：准确吸取标准储备溶液（4.8)0.1mL移至10mL容量瓶中，用中醇定容至刻度。
4.10固相苯取柱：填料为ProElutCls-U或相当者，1000mg，6mL。使用前依次用5mL甲醇（4.1）和10mL水活化，保持柱体湿润。1）非商业性声明：文中列出的固相萃取柱填料类型仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的固相萃取柱。1
SN/T4654—2016
滤膜：0.2um。尼龙。
仪器和设备
超高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。分析天平：感量0.0001g和0.01g。液体混匀器。
5.4玻璃贮液器：约50ml。下端带磨口，可连接固相萃取柱。5.5
固相萃取装置。
10mL玻璃刻度管。
玻璃棉：甲醇浸泡，使用前用去离子水将甲醇冲洗干净。6
试样的制备与保存
试样的制备
对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀，对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅勾，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并作上标记
6.2试样保存
将试样于常温下保存。
测定步骤
7.1提取
称取5g试样，精确至0.01g。置于150mL三角瓶中，加人20mLTris缓冲溶液，于液体混勾器L快速混匀1min，使试样完全溶解。7.2净化
将塞有玻璃棉的玻璃贮液器连到ProElutCi8-U固相萃取柱上，把样液倒入贮液器中，调节流速小于3mL/min待样液完全流出后，用10ml.水洗柱，弃去全部流出液。用4mL乙睛洗脱于10mL刻度管中，加水定容至10mL。过0.2um滤膜后，供液相色谱申联质谱仪测定。7.3基质空白溶液的制备
按7.1和7.2操作步骤，制备用于配制系列基质标准工作溶液的样品空白提取液。测定条件
液相色谱参考条件：
色谱柱：Ci柱，100mmX2.1mm（内径），l.8μm：a)
流动相：A：乙，B：水。梯度洗脱条件见表1。进样量：10μL；
柱温：30℃；
iKAoNiKAca
流速：0.3mL/min
时间/min
质谱参考条件：
电离方式：电喷雾电离：
扫描方式：负离子扫描；
检测方式：多反应监测（MRM)；电喷雾电压：—5500V；
雾化气压力：0.069MPa；
气帘气压力：0.069MPa：
辅助气流速：7L/min；
离子源温度：450℃；Www.bzxZ.net
表1梯度洗脱条件
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压：见表2表2定性离子对、定量离子对、碰撞能量和去簇电压化合物名称
为定量离子对。
液相色谱-质谱/质谱测定
7.5.1定性测定
定性离子对(m/=）
377.9/341.9
377.9/242.0
去簇电压/V
SN/T4654—2016
碰撞能量/eV
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同的试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差土2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在对应的待测物。
3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差表3
相对离子丰度K/%
允许最大偏差/%
20≤K50
10≤K≤20
K≤10
KAoNrKAca
SN/T4654—2016
7.5.2定量测定
吸取不同体积标准工作溶液（4.9），用空白样品提取液（7.3）配成5.0ng/mlL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL.60.0ng/mL、100.0ng/ml不同浓度的基质标准工作溶液。现用现配。在仪器的最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以标准溶液被测组分浓度为横坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中氯舒隆的响应值均应在仪器测定的线性范国内。在上述色谱条件和质谱条件下，氯舒隆的参考保留时间为1.5min。氛舒隆标准物质多反应监测（MRM)色谱图参见图A.1。7.6空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行结果计算和表述
蜂蜜中氯舒隆残留量的测定按式（1）计算，并保留两位有效数字：AXXV
A.xmx1000
式中：
试样中被测物残留量，单位为微克每千克（ug/kg）；A
试样溶液中被测物的色谱峰面积，标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每升（g）(mL)
样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）注：计算结果应扣除空白值。
定量限和回收率
9.1定量限
本方法对氯舒隆检测的定量限为5.0ug/kg9.2添加浓度和回收率
添加浓度和回收率数据见表4。
表4蜂蜜中氯舒隆的添加回收率
化合物
添加浓度/(μg/kg)
回收率范围/%
67.0~84.2
73.8~91.6
氯舒隆
84.0~94.5
86.5~96.8
（1）
87.8~98.9
rKAoNKAca
见图A.1。
附录A
（资料性附录）
氯舒隆标准物质多反应监测（MRM）色谱图1.52
0.60.81.0
SN/T4654—2016
377.9/341.9
377.9/242.0
氯舒隆标准物质多反应监测（MRM）色谱图图A.1
rKAoNKAca
SN/T4654—2016
Foreword
ThisstandardisdraftedinaccordancewiththeGB/T1.1-2009This standard was proposed by and is under the charged of the Certification and Accreditation Ad-ministration of the People's Republic of China.This standard was drafted by Qinhuangdao Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of thePeople's Republic of China,Jilin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of the People'sRepublic of China The principal drafters of this standard are Cao yanzhong,Jia guangqun,Wu lian-peng,Wanglei,Lixiang,Shiyuqiu.Songao.-iKAoNiKAca
SN/T4654—2016
Determinationofclorsulonresidueinhoneyforexport-LC-MS/MSmethod
This standard specifies the method of the determination of Clorsulon residues in honey for export byLC-MS-MS.
This standard is applicable to the determination of Clorsulon residues in honey for export,Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document.For datedreferences,only edition cited applies.For undated references,the latest edition of the referenceddocument（includinganyamendments)appliesGB/T6682Waterforanalytical laboratoryuse-SpecificationsandtestmethodPrinciple
The clorsulon residue is extracted from test sample with Tris buffer(pH=9),then after filtering,cleaned up on a Cs cartridge,the clorsulon residue is determined and confirmed by LC-MS-MS,usingexternal standard method.
Reagents and materials
Unless otherwise specified,all reagents used should be analytical grade,and the\water\is distilledwater.
4.1Methanol:HPLCgrade.
Acetonitrile:HPLCgrade.
4.3Tris-hydroxymethyl-amino-methane(Tris)：guaranteereagent.SN/T4654—2016
4.4Calcium chloride(CaCl22H,O):guaranteereagent.4.5 Hydrochloric acid:guarantee reagent.6Clorsulonstandard：CgH.ClN.O4S,（CAsNo.60200-06-8)，purity≥99%4.6
4.70.1mol/LTris buffer solution:Weigh12.0 gTris-hydroxymethyl-amino-methane(4.3)and7.35gCalciumchloride(4.4)into1000mLvolumetricflask,dissolvein800mLwater,pHadjustto9.0byhydrochloric acid(4.5),and finally set the volume of the solution to1ooo mL bywater.4.8o.1mg/mLstandardsworkingsolution:Weighappropriateamountof clorsulonstandard(4.6),dilute with methanol to preparethe standardstorksolutionsofo.1mg/mLinconcentration.4.9Standardworkingsolution:1.0μg/mL.Pipette0.1mLstandard storksolution(4.8)into10mLvolumetricflask,dilutesolutiontovolume4.10
methanol
solid extraction columns:ProElut Ca-Utor equivalent.1 000mg,6mL.Conditioningthe
columnwith5mLmethanol(4.1)followedby10mLwaterbeforeuse,andkeepmoist.4.11
Filterdiaphragm:0.2um
Instruments andequipment
5.1UPLC-MS-MS:EquippedwithESIsource.
5.2Analytical balance:capable ofweighing to 0.0001g and 0.01g.5.3Vortexmixer.
ReservoirsandadapterstofitSPEcolumns:50mL5.5S
Solidphaseextractionvacuumapparatus.5.6
Sampletube:10mL
Glass wool:soakingwithmethanol,and cleaned withwaterbeforeusing.5.8pH meter:Measuring accuracy ±0.02.Non-commercial statement:The solid-phaseextraction column used is for reference only.The standard users1)
are encouraged to use different type of solid phase extraction columns of different manufacturers8
Preparation and storage of test sample6
6.1Preparationof testsample
SN/T4654—2016
If thesample is not crystallized,mix it thoroughlybystirring.Ifcrystallized,placetheclosed containerinawater-bath,warmat6owithoccasional shakinguntil liquefied,mixthoroughlyandpromptlycool it to room temperature.Pour O.5 kg of the prepared test sample into a clean and dry sample bot-tle.Sealed and labeled.
6.2Storageof sample
The test samples should be stored at ambient temperature
Procedure
Extraction
Weigh5gtestsampleaccurateto0.01g)into150mLerlenmeyerflask.Add20mLTrisbuffersolu-tion to each sample.Mix vigorouslyImin on vortexmixer.until honey is completely dissolved.7.2Cleanup
Connect a reservoir withglass woolIplugtoaCi
Ucartridge.The
honey sample solution is decantedintothereservoir,adjustingtheflowrateto<3mL/min.Wait
till sample solution has thoroughlydrained,then Rinse the cartridge with 1o mL water.Discard all the effluents.Finally elute clorsulonwith4mL acetonitrile into the 10 mL sample tube.The eluted solution was setto a constant volumeof10mLwithwater，filteredanddeterminedbyLC-M/MsPreparation of matrixblank solution7.3
Honeyblanksampleextractispreparedaccordingto7.1and7.2,which isusedtopreparethematrix-matched standard working solutions.7.4
Determination conditions
1LCconditions：
Chromatographiccolumn:Cs，100mmx2.1mm，1.8umi.d；a
SN/T4654—2016
Mobile phase:A,acetonitrile,B,H,O gradient elution conditions see Table 1;Injectionvolumes:10μL;
Columntemperature:30C：
Flow:0.3mL/min;
Table1-GradientelutionconditionTime/min
MSconditions：
lon source:ESIsource;
Scan mode:Negativescan;
Monitormode：Multiplereactionmonitoring;lonsprayvoltage:-5500V;
Nebulizergas:0.069MPa
Curtain gas:0.069 MPa;
Turbo ionspray gas rate:7 L/min;Source temperature:450℃；
Precursor/product ion pair,declustering potential,and collision energy see Table 2.10
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。
出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
Determination of clorsulon residue in honey for export-LC-MS/MSmethod
2016-08-23发布
中华人民共和国
玉家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。SN/T4654—2016
本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国吉林出入境检验检疫局
本标准主要起草人：曹彦忠、贾光群、吴连鹏、王蕾、李响、石玉秋、宋翱。1
1范围
出口蜂蜜中氯舒隆残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法
本标准规定了出口蜂蜜中氯舒隆残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于出口蜂蜜中氯舒隆残留量的定量测定和确证2规范性引用文件
SN/T4654—2016
下列文件对于本文的应用是必不可少的。凡是注口期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
试样中的氯舒隆用三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液（pH一9）提取，提取液经C18固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪检测和确证，外标法定量。4试剂和材料
除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水，甲醇：色谱纯。
乙腈：色谱纯。
三羟甲基氨基甲烷（Tris）：优级纯。氯化钙（CaCl·2H,O)：优级纯。盐酸：优级纯。
氯舒隆（Clorsulon）标准物质：C.HCN.O,Sz，CASNo.60200-06-8，纯度≥99%。4.6
4.70.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris)缓冲溶液：称取12.0g三羟甲基氨基甲烷（4.3)和7.35g氯化钙（4.4），放人1000mL烧杯中，加入800mL水溶解，用盐酸（4.5）调至pH值为9.0，再用水定容至1000mLg
4.80.1mg/mL标准储备溶液：准确称取适量的氯舒隆标准物质（4.6），用甲醇配成0.1mg/mL的标准储备溶液。
4.91.0μg/ml.标准工作溶液：准确吸取标准储备溶液（4.8)0.1mL移至10mL容量瓶中，用中醇定容至刻度。
4.10固相苯取柱：填料为ProElutCls-U或相当者，1000mg，6mL。使用前依次用5mL甲醇（4.1）和10mL水活化，保持柱体湿润。1）非商业性声明：文中列出的固相萃取柱填料类型仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的固相萃取柱。1
SN/T4654—2016
滤膜：0.2um。尼龙。
仪器和设备
超高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。分析天平：感量0.0001g和0.01g。液体混匀器。
5.4玻璃贮液器：约50ml。下端带磨口，可连接固相萃取柱。5.5
固相萃取装置。
10mL玻璃刻度管。
玻璃棉：甲醇浸泡，使用前用去离子水将甲醇冲洗干净。6
试样的制备与保存
试样的制备
对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀，对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅勾，冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并作上标记
6.2试样保存
将试样于常温下保存。
测定步骤
7.1提取
称取5g试样，精确至0.01g。置于150mL三角瓶中，加人20mLTris缓冲溶液，于液体混勾器L快速混匀1min，使试样完全溶解。7.2净化
将塞有玻璃棉的玻璃贮液器连到ProElutCi8-U固相萃取柱上，把样液倒入贮液器中，调节流速小于3mL/min待样液完全流出后，用10ml.水洗柱，弃去全部流出液。用4mL乙睛洗脱于10mL刻度管中，加水定容至10mL。过0.2um滤膜后，供液相色谱申联质谱仪测定。7.3基质空白溶液的制备
按7.1和7.2操作步骤，制备用于配制系列基质标准工作溶液的样品空白提取液。测定条件
液相色谱参考条件：
色谱柱：Ci柱，100mmX2.1mm（内径），l.8μm：a)
流动相：A：乙，B：水。梯度洗脱条件见表1。进样量：10μL；
柱温：30℃；
iKAoNiKAca
流速：0.3mL/min
时间/min
质谱参考条件：
电离方式：电喷雾电离：
扫描方式：负离子扫描；
检测方式：多反应监测（MRM)；电喷雾电压：—5500V；
雾化气压力：0.069MPa；
气帘气压力：0.069MPa：
辅助气流速：7L/min；
离子源温度：450℃；Www.bzxZ.net
表1梯度洗脱条件
定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压：见表2表2定性离子对、定量离子对、碰撞能量和去簇电压化合物名称
为定量离子对。
液相色谱-质谱/质谱测定
7.5.1定性测定
定性离子对(m/=）
377.9/341.9
377.9/242.0
去簇电压/V
SN/T4654—2016
碰撞能量/eV
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同的试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差土2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在对应的待测物。
3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差表3
相对离子丰度K/%
允许最大偏差/%
20≤K50
10≤K≤20
K≤10
KAoNrKAca
SN/T4654—2016
7.5.2定量测定
吸取不同体积标准工作溶液（4.9），用空白样品提取液（7.3）配成5.0ng/mlL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、40.0ng/mL.60.0ng/mL、100.0ng/ml不同浓度的基质标准工作溶液。现用现配。在仪器的最佳工作条件下，用基质标准工作溶液分别进样，以标准溶液中被测组分峰面积为纵坐标，以标准溶液被测组分浓度为横坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中氯舒隆的响应值均应在仪器测定的线性范国内。在上述色谱条件和质谱条件下，氯舒隆的参考保留时间为1.5min。氛舒隆标准物质多反应监测（MRM)色谱图参见图A.1。7.6空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行结果计算和表述
蜂蜜中氯舒隆残留量的测定按式（1）计算，并保留两位有效数字：AXXV
A.xmx1000
式中：
试样中被测物残留量，单位为微克每千克（ug/kg）；A
试样溶液中被测物的色谱峰面积，标准工作溶液中被测物的浓度，单位为纳克每升（g）(mL)
样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；标准工作溶液中被测物的色谱峰面积；试样溶液所代表试样的质量，单位为克（g）注：计算结果应扣除空白值。
定量限和回收率
9.1定量限
本方法对氯舒隆检测的定量限为5.0ug/kg9.2添加浓度和回收率
添加浓度和回收率数据见表4。
表4蜂蜜中氯舒隆的添加回收率
化合物
添加浓度/(μg/kg)
回收率范围/%
67.0~84.2
73.8~91.6
氯舒隆
84.0~94.5
86.5~96.8
（1）
87.8~98.9
rKAoNKAca
见图A.1。
附录A
（资料性附录）
氯舒隆标准物质多反应监测（MRM）色谱图1.52
0.60.81.0
SN/T4654—2016
377.9/341.9
377.9/242.0
氯舒隆标准物质多反应监测（MRM）色谱图图A.1
rKAoNKAca
SN/T4654—2016
Foreword
ThisstandardisdraftedinaccordancewiththeGB/T1.1-2009This standard was proposed by and is under the charged of the Certification and Accreditation Ad-ministration of the People's Republic of China.This standard was drafted by Qinhuangdao Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of thePeople's Republic of China,Jilin Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of the People'sRepublic of China The principal drafters of this standard are Cao yanzhong,Jia guangqun,Wu lian-peng,Wanglei,Lixiang,Shiyuqiu.Songao.-iKAoNiKAca
SN/T4654—2016
Determinationofclorsulonresidueinhoneyforexport-LC-MS/MSmethod
This standard specifies the method of the determination of Clorsulon residues in honey for export byLC-MS-MS.
This standard is applicable to the determination of Clorsulon residues in honey for export,Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document.For datedreferences,only edition cited applies.For undated references,the latest edition of the referenceddocument（includinganyamendments)appliesGB/T6682Waterforanalytical laboratoryuse-SpecificationsandtestmethodPrinciple
The clorsulon residue is extracted from test sample with Tris buffer(pH=9),then after filtering,cleaned up on a Cs cartridge,the clorsulon residue is determined and confirmed by LC-MS-MS,usingexternal standard method.
Reagents and materials
Unless otherwise specified,all reagents used should be analytical grade,and the\water\is distilledwater.
4.1Methanol:HPLCgrade.
Acetonitrile:HPLCgrade.
4.3Tris-hydroxymethyl-amino-methane(Tris)：guaranteereagent.SN/T4654—2016
4.4Calcium chloride(CaCl22H,O):guaranteereagent.4.5 Hydrochloric acid:guarantee reagent.6Clorsulonstandard：CgH.ClN.O4S,（CAsNo.60200-06-8)，purity≥99%4.6
4.70.1mol/LTris buffer solution:Weigh12.0 gTris-hydroxymethyl-amino-methane(4.3)and7.35gCalciumchloride(4.4)into1000mLvolumetricflask,dissolvein800mLwater,pHadjustto9.0byhydrochloric acid(4.5),and finally set the volume of the solution to1ooo mL bywater.4.8o.1mg/mLstandardsworkingsolution:Weighappropriateamountof clorsulonstandard(4.6),dilute with methanol to preparethe standardstorksolutionsofo.1mg/mLinconcentration.4.9Standardworkingsolution:1.0μg/mL.Pipette0.1mLstandard storksolution(4.8)into10mLvolumetricflask,dilutesolutiontovolume4.10
methanol
solid extraction columns:ProElut Ca-Utor equivalent.1 000mg,6mL.Conditioningthe
columnwith5mLmethanol(4.1)followedby10mLwaterbeforeuse,andkeepmoist.4.11
Filterdiaphragm:0.2um
Instruments andequipment
5.1UPLC-MS-MS:EquippedwithESIsource.
5.2Analytical balance:capable ofweighing to 0.0001g and 0.01g.5.3Vortexmixer.
ReservoirsandadapterstofitSPEcolumns:50mL5.5S
Solidphaseextractionvacuumapparatus.5.6
Sampletube:10mL
Glass wool:soakingwithmethanol,and cleaned withwaterbeforeusing.5.8pH meter:Measuring accuracy ±0.02.Non-commercial statement:The solid-phaseextraction column used is for reference only.The standard users1)
are encouraged to use different type of solid phase extraction columns of different manufacturers8
Preparation and storage of test sample6
6.1Preparationof testsample
SN/T4654—2016
If thesample is not crystallized,mix it thoroughlybystirring.Ifcrystallized,placetheclosed containerinawater-bath,warmat6owithoccasional shakinguntil liquefied,mixthoroughlyandpromptlycool it to room temperature.Pour O.5 kg of the prepared test sample into a clean and dry sample bot-tle.Sealed and labeled.
6.2Storageof sample
The test samples should be stored at ambient temperature
Procedure
Extraction
Weigh5gtestsampleaccurateto0.01g)into150mLerlenmeyerflask.Add20mLTrisbuffersolu-tion to each sample.Mix vigorouslyImin on vortexmixer.until honey is completely dissolved.7.2Cleanup
Connect a reservoir withglass woolIplugtoaCi
Ucartridge.The
honey sample solution is decantedintothereservoir,adjustingtheflowrateto<3mL/min.Wait
till sample solution has thoroughlydrained,then Rinse the cartridge with 1o mL water.Discard all the effluents.Finally elute clorsulonwith4mL acetonitrile into the 10 mL sample tube.The eluted solution was setto a constant volumeof10mLwithwater，filteredanddeterminedbyLC-M/MsPreparation of matrixblank solution7.3
Honeyblanksampleextractispreparedaccordingto7.1and7.2,which isusedtopreparethematrix-matched standard working solutions.7.4
Determination conditions
1LCconditions：
Chromatographiccolumn:Cs，100mmx2.1mm，1.8umi.d；a
SN/T4654—2016
Mobile phase:A,acetonitrile,B,H,O gradient elution conditions see Table 1;Injectionvolumes:10μL;
Columntemperature:30C：
Flow:0.3mL/min;
Table1-GradientelutionconditionTime/min
MSconditions：
lon source:ESIsource;
Scan mode:Negativescan;
Monitormode：Multiplereactionmonitoring;lonsprayvoltage:-5500V;
Nebulizergas:0.069MPa
Curtain gas:0.069 MPa;
Turbo ionspray gas rate:7 L/min;Source temperature:450℃；
Precursor/product ion pair,declustering potential,and collision energy see Table 2.10
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。