SN/T 4675.17-2016
基本信息
标准号： SN/T 4675.17-2016
中文名称：出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法
标准类别：商检行业标准(SN)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 出口 葡萄酒 丁基 含量 测定 相色谱 质谱 质谱法
标准分类号
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出版信息
相关单位信息
标准简介
SN/T 4675.17-2016.Determination of butyltin compounds in wine for export-GC-MS/MS method.
1范围
SN/T 4675.17规定了出口葡萄酒中丁基锡含量测定的气相色谱质谱/质谱法。
SN/T 4675.17适用于葡萄酒中一丁基锡二丁基锡和三丁基锡含量的测定。
SN/T 4675.17包含两种样品前处理方法:第一法:液液萃取法;第二法:固相微萃取法。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在醋酸-醋酸钠(HAcNaAc)缓冲溶液中进行乙基化衍生,经二氯甲烷液液分配萃取,佛罗里土柱固相萃取净化,正已烷洗脱,浓缩后进行气相色谱-质谱/质谱分离和检测，内标法定量。
4试剂和材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
4.1冰醋酸,优级 纯。
4.2醋酸钠。
4.3四氢呋喃，色谱纯。
4.4甲醇，色谱纯。
4.5 正已烷，色谱纯。
4.6二氯甲烷,色谱纯。
1范围
SN/T 4675.17规定了出口葡萄酒中丁基锡含量测定的气相色谱质谱/质谱法。
SN/T 4675.17适用于葡萄酒中一丁基锡二丁基锡和三丁基锡含量的测定。
SN/T 4675.17包含两种样品前处理方法:第一法:液液萃取法;第二法:固相微萃取法。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在醋酸-醋酸钠(HAcNaAc)缓冲溶液中进行乙基化衍生,经二氯甲烷液液分配萃取,佛罗里土柱固相萃取净化,正已烷洗脱,浓缩后进行气相色谱-质谱/质谱分离和检测，内标法定量。
4试剂和材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
4.1冰醋酸,优级 纯。
4.2醋酸钠。
4.3四氢呋喃，色谱纯。
4.4甲醇，色谱纯。
4.5 正已烷，色谱纯。
4.6二氯甲烷,色谱纯。
标准图片预览
标准内容
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4675.17—2016
出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法
Determination of butyltin compounds in wine fonexport-GC-MS/MSmethod
2016-12-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
刮涂层香真伪
2017-07-01实施
SN/T4675出口葡葡酒质量安全分析方法》共分为30个部分：SN/T4675.1
SN/T4675.2
SN/T 4675.3
-SN/T4675.4
SN/T4675.5
SN/T4675.6
SN/T4675.7
SN/T4675.8
SN/T 4675.9
SN/T 4675.10
SN/T 4675.11
SN/T 4675.12
SN/T4675.13
SN/T 4675.14
SN/T 4675.15
SN/T4675.16
SN/T 4675.17
SN/T 4675.18
SN/T 4675.19
SN/T4675.20
SN/T 4675.21
SN/T 4675.22
SN/T4675.23
SN/T4675.24
SN/T 4675.25
SN/T4675.26
SN/T 4675.27
出口葡萄酒中甘油的测定酶法；出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定气相色谱法；出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；出口葡萄酒中乳酸的测定酶法；出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法；出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定；出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法：出口葡萄酒中5-羟甲基糖醛的测定液相色谱法；出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法：SN/T4675.17—2016
出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱质谱/质谱法：出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法：出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法；出口葡萄酒中2,4，6-三氯苯甲醚残留量的测定；出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法：出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法：出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法：出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法；出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法；出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法；出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法；出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法；出口葡萄酒颜色的测定
CIE1976（Lab）色空间法：
出口葡萄酒浊度的测定散射光法；出口葡萄酒碱性灰分的测定；
SN/T4675.28
出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数：SN/T 4675.29
出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法；SN/T4675.30出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。本部分为SN/T4675的第17部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局。
本部分主要起草人：崔宗岩、葛娜、刘晓茂、高飞、王飞、钱云开、李响、钟亚莉、王海洋、周乐、杨迪、李学民、曹彦忠、刘青、李志勇。1
1范围
出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法
SN/T4675.17—2016
SN/T4675的本部分规定了出口葡萄酒中丁基锡含量测定的气相色谱-质谱/质谱法。本部分适用于葡萄酒中一丁基锡、门本场科
厂基锡含量的测定。
本部分包含两种样品前处理方法：第一法：液液萃取法，第二法：固相微萃取法。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法第一法液液萃取法
3方法提要
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液中进行乙基化衍生，经二氯甲烷液液分配萃取，佛罗里土柱固相萃取净化，正已烷洗脱，浓缩后进行气相色谱-质谱/质谱分离和检测，内标法定量。
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水4.1冰酷酸，优级纯。
醋酸钠。
4.3四氢呋喃，色谱纯。
甲醇，色谱纯。
正已烷，色谱纯。
二甲烷·色谱纯。
无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，贮存于密封容器中备用。醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc)缓冲溶液（0.2mol/L）：采用适量冰醋酸（4.1)和醋酸钠（4.2)及超纯水配4.8
制，调节pH=4.5。
4.9四乙基硼化钠标准品（Sodiumtetraethylborate，简写NaBEt，分子式：C，H2.BNa，CAS号1552324-7）：纯度≥98%。
4.10四乙基硼化钠储备液（20%，质量体积比）：取四乙基硼化钠标准品（4.9）1.0g，在冰水浴条件下溶解于5ml四氢呋喃（4.3）中，混合均匀，置于冰箱一20℃保存。4.11四乙基硼化钠工作液（2%，质量体积比），四乙基硼化钠储备液（4.10）用超纯水稀释获得。每工1
SN/T4675.17-2016
作日现用现配。
注：VaBEt在空气中容易氧化而降低衍生效率，因而其母液要配置于四氢哺溶液中，并在冰箱中冷冻保存。工作液每工作日现用现配。
一丁基锡标准品（Monobutyltintrichloride，MBT，C,H,SnCls，CAS号1118-46-3）：纯度≥97%。4.12
3二丁基锡标准品（Dibutyltindichloride，DBT，C，HSnClz，CAS号683-18-1）：纯度≥97.2%。4.13
三丁基锡标准品（Tributyltinchloride，TBT，CHSnCl,CAS号1461-22-9）：纯度≥97%。4.15
三丙基锡标准品（Tripropyltinchloride.TPrT，C，HzSnCl,CAS号2279-76-7）：纯度≥95%。4.16标准储备液：准确称取适量一丁基锡、二丁基锡、三丁基锡和三丙基锡标准品，分别用甲醇（4.4）配制成1000μg/mL（以锡计）的标准储备液，一20℃条件下保存。4.17标准工作液：根据检测要求用超纯水用标准储备液（4.16）稀释成1μg/mL（以锡计）的标准工作溶液，4℃条件下保存。
4.18佛罗里硅土（Florisil)固相萃取柱：1g/6mL或相当者，柱内装填高度约1cm的无水硫酸钠（4.7），使用前预先用6mL正已烷（4.5）活化，仪器和设备
5.1气相色谱-质谱/质谱仪：配有电子轰击离子源（EI）。5.2振荡器。
5.3电子天平：感量0.1mg和10mg。5.4离心管：50ml.
旋转蒸发器。
低速离心机：3000r/min。
氮吹仪。
固相萃取装置。
6测定步骤
试样制备
非起泡酒样品可以直接测定；起泡酒需预先脱气，将100IⅡL试样倒入带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。6.2
2衍生和提取
称取5.0g均勾葡萄酒样品（精确到0.01g）于50mL离心管（5.4）中，向其中加人内标三丙基锡工作液（4.17)100μL，混勾后继续加人5.0mLHAc-NaAc缓冲溶液（4.8）、50μL四乙基硼化钠工作液（4.11）和20mL二氯甲烷（4.6）溶液，在振荡器（5.2）上震荡萃取30min。在3000r/min下离心3min取上清液于150ml浓缩瓶中。残液中再次加人二氯甲烷20mL重复萃取并合并提取液，于35℃水浴中减压浓缩至近干。向其中加入约2mL正己烷溶解残渣，待净化。6.3净化
将Florisil固相萃取小柱（4.18)安装在固相萃取装置（5.8）上，活化后将上述浓缩的提取液全部转移至Florisil柱上，分两次分别用1mL正已烷清洗衍生液，并待Florisil柱中溶液的液面降至无水硫酸钠层时，将其转移至柱上。再用10ml.正已烷溶液洗脱，控制流速小于等于3mL/min，收集全部流出液，35℃氮吹浓缩至1mL以下，用正已烷定容至1mL，供气相色谱质谱/质谱测定和确证。2
-TKAONTKAca
6.4标准溶液的制备
SN/T 4675.17—2016
取适量标准工作溶液（4.17），加入超纯水稀释混匀使其总体积为5mL。按照与样品相同的方法进行衍生，提取和净化。
6.5气相色谱-质谱/质谱参考条件a)
色谱柱：石英毛细管柱DB-1701，（30m×0.25mm×.0.25μm）或相当者；色谱柱温度：初始温度50℃，保持1min，以30℃/min升至290℃，保持6min；进样口温度：290℃；
色谱-质谱接口温度：280℃
离子源温度：230℃；
载气：氮气，纯度≥99.999%；
进样量：1.0μL；
进样方式：无分流进样，1min后打开分流阀；电离方式：EI,70eV；
测定方式：多离子反应监测模式（MRM），具体条件见表1；溶剂延迟：4.5min。
表1三种丁基锡及内标三丙基锡的乙基化衍生产物的MRM条件化合物
TPrT(IS)
注：TS内标
保留时间/min
6.6色谱测定与确证
定量离子对（碰撞能量/eV）
179>151(5)
193151(5)
263>207(5）
291>235(5)
辅助定性离子对（撞能量/eV）
179123(10)
193>123(10)
263≥151(10)
291≥179(10)
根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准溶液，对标准溶液与样液等体积参插进样测定，标准溶液和待测样液中丁基锡衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准溶液的MRM色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，并且在扣除背景之后的质量色谱图中，所选离子（见表1）均出现，所选离子丰度比与标准品对应离子丰度比，其值在允许范围内（见表2），则目标物确定检出。在上述色谱条件下，三种丁基锡及内标三丙基锡的乙基化衍生产物的保留时间见表1。四种衍生物的气相色谱-质谱/质谱的MRM色谱图和质谱图参见图A.1~图A.5。表2气相色谱-质谱定性确证时相对离子对丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
允许的相对偏差/%
6.7空白试验
除不加试样外，均按照上述测定步骤进行。>20~50
>10~20
rKAoNrKAca
SN/T4675.17—2016
7结果计算和表述
用色谱数据工作站或按照式（1）计算试样中丁基锡化合物的含量，计算结果需扣除空白值，结果保留2位有效数字，计算结果均以锡计，如果转化为以丁基锡离子形式计，一丁基锡（C,H，Sn+）、二丁基锡（CgHSn2+）和三丁基锡（CzHzSn*）换算系数分别为：1.48，1.95和2.43。X
式中：
C XAXCXAXVXI000
A.XCXAXmX1000
试样中被测物含量，单位为微克每于克（ug/kg.以锡计）标准液中被测物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL，以锡计）：试样溶液中被测物的色谱峰面积：标准溶液中被测物的色谱峰面积试样溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/ml，以锡计）；标准液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/ml，以锡计)；标准溶液中内标物的色谱峰面积：试样溶液中内标物的色谱峰面积：样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：最终样液所代表的试样量，单位为克（g）定量限、回收率和精密度
定量限
本方法中3种丁基锡化合物的定量限均为2.0ug/kg.以锡计。8.2回收率
.（1)
采用液液萃取和气相色谱-质谱/质谭法进行检测，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表3。8.3精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的15%。表3代表性样品基质在不同添加浓度下的回收率和精密度数据（液液萃取法，n=6）添加水平
典型基质
红葡萄酒
(以锡计）
丁基锡
三丁基锡
回收率范围相对标准偏差
回收率范围
相对标准偏差
71.0--91.8
80.2-93.4
89.3~-100.4
71.8-89.1
81.3~95.0
82.7~95.9
89.3~99.8
三丁基锡
回收率范围
84.3~97.7
87.8~~98.8
相对标准偏差
KAoNrKAca
添加水平
典型基质
白葡萄酒
桃红葡
9方法提要
（以锡计）
μg/kg
一丁基锡
回收率范围
70.7~87.5
80.3~94.0
87.7~~97.5
90.4-~100.4
70.9~86.6
86.2~101.2
92.2102.8
表3（续）
相对标准偏差
丁基锡
回收率范围
74.0~90.6
78.1~-92.2
84.1~-96.6
88.1~96.4
71.1~86.4
80.5--95.9
92.6~97.4
固相微萃取法
相对标准偏差
SN/T 4675.17—2016
三丁基锡
回收率范围
71.9~91.4
84.0~~97.6
88.3~-101.6
92.9~100.2
74.7--89.2
84.3~97.6
88.6-~103.3
相对标准偏差
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在HAc-NaAc缓冲溶液中进行乙基化衍生，同时在磁力搅拌条件下进行项空固相微萃取，完成后萃取纤维直接插人气相色谱进样口进行解析、分离和检测，内标法定量。10试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的
一级水
冰醋酸，同4.1。
醋酸钠，同4.2。
四氢呋喃，同4.3
醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc)缓冲溶液，同4.8。四乙基硼化钠，同4.9。
四乙基硼化钠储备液（20%，质量体积比），同4.10。四乙基硼化钠工作液（2%、质量体积比），同4.11。丁基锡标准品，同4.12。
二丁基锡标准品，同4.13。
三丁基锡标准品，同4.14。
三丙基锡标准品，同4.15。
标准储备液，同4.16。
标准工作液，将第一法中的标准溶液（4.17）用超纯水稀释至终浓度为100ng/mL（以锡计），现用现配。
IKoNKca
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仪器和设备
气相色谱-质谱/质谱仪，同5.1。电子天平，同5.3。
手动固相微苯取装置。
固相微萃取纤维，表面涂层为100μm聚二甲基硅氧烷（PDMS）。11.4
顶空瓶，50mlL。
磁力搅拌器，配置磁子。
测定步骤
固相微萃取
称取5.0g均勾葡萄酒样品（精确到0.01g）于50mL顶空瓶（11.5）中，向其中加人内标三丙基锡工作液（10.13)50μL，混匀后继续加人20.0mLHAc-NaAc缓冲溶液（10.4）、50μL四乙基硼化钠工作液（10.7）和聚四氟磁子，将固相微萃取装置（11.3）固定在顶空瓶上，伸出萃取纤维于顶空环境中，在900r/min条件下磁力搅拌20min。之后立即取出纤维，插人气相色谱进样口进行解析、分离和检测。解析时间为1min。
2标准溶液的制备
取适量标准工作溶液（10.13），加人超纯水稀释混勾，使其总体积为5mL。按照与样品相同的处理方法（12.1）进行固相微萃取和气相色谱-质谱/质谱检测。12.3气相色谱-质谱/质谱参考条件同6.5。
色谱测定与确证
同6.6。
12.5空白试验
同6.7。
结果计算和表述
同第7章。
定量限、回收率和精密度
14.1定量限
本方法中3种丁基锡化合物的定量限均为0.050μg/kg，以锡计。14.2回收率
采固相微萃取和气相色谱-质谱/质谱法进行检测，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表4。6
rKAoNirKAca
精密度
SN/T4675.17—2016
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的20%。表4代表性样品基质在不同添加浓度下的回收率数据（固相微萃取法，n=6）添加水平
典型基质
红葡萄酒
白葡萄酒
桃红葡
（以锡计）
—丁基锡
回收率范围
64.3~95.4
73.1~90.4
74.4-~94.6
86.7-~105.3
61.7~96.9
73.9~95.2
77.6~102.6
83.5~113.4
74.1~95.6
75.2~95.8
81.2~-96.4
相对标准偏差
二丁基锡
回收率范围
71.2-90.3
79.2~98.4
87.8~102.3
69.8~99.6
73.4~94.6
87.9~105.4
66.4~-92.1
79.4~~100.6
97.5-~114.1
相对标准偏差
三丁基锡
回收率范围
67.3-96.5
75.6~98.2
87.2~102.4
75.6103.5
79.2~95.9免费标准bzxz.net
76.2~96.6
85.7~109.9
80.1-102.5
84.3-97.6
88.9-106.8
相对标准偏差
SN/T 4675.17—2016
附录A
（资料性附录）
一丁基锡、三丙基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物的（MRM）色谱图和质谱图丁基锡、三内基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物的（MRM）色谱图和质谱图见图A.1~图A.5。
20150307-BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100
20150307-BTStd-100ul
20150307-BT-Std-100ul
20150307-BT-Std-100μl
4.804.905.005.10m
TTTTTT
20150307BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100 μl
575580585
1:MRM of2 Channels EI+
179>151(MBT)
1:MRMof2ChannelsEl+
179>23(MBT)
2:MRM of 2 Channels EI+
193>151(TPrT）
2:MRMof2ChannelsEI+
193>123(TPrT)
3:MRMof2Channels EI+
263>207(DBT)
3:MRMof2ChannelsEI+
263>151(DBT)
4:MRM of2ChannelsEI+
291>235(TBT)
4:MRM of 2 Channels EI+
291>179(TBT
图A.1一丁基锡、三丙基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物（一丁基三乙基锡、三丙基乙基锡、二丁基二乙基锡和三丁基乙基锡）的（MRM）色谱图（标准添加浓度为20μg/kg，以锡计）8
5667718283
8491111
189201
一丁基锡乙基化衍生物
135139
1571738285 110
171185
SN/T4675.17—2016
264269281283297309 324 341343349m/
丁基三乙基锡的质谱图
212227
135426928128429731332327383413432604
三丙基锡乙基化衍生产物三丙基乙基锡的质谱图9
SN/T4675.172016
92.1113.0
二丁基锡乙基化衍生产物二丁基二乙基锡的质谱图207
555669738387
173181
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2225355
三丁基锡乙基化衍生产物三丁基乙基锡的质谱图hm/=
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出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法
Determination of butyltin compounds in wine fonexport-GC-MS/MSmethod
2016-12-12发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
刮涂层香真伪
2017-07-01实施
SN/T4675出口葡葡酒质量安全分析方法》共分为30个部分：SN/T4675.1
SN/T4675.2
SN/T 4675.3
-SN/T4675.4
SN/T4675.5
SN/T4675.6
SN/T4675.7
SN/T4675.8
SN/T 4675.9
SN/T 4675.10
SN/T 4675.11
SN/T 4675.12
SN/T4675.13
SN/T 4675.14
SN/T 4675.15
SN/T4675.16
SN/T 4675.17
SN/T 4675.18
SN/T 4675.19
SN/T4675.20
SN/T 4675.21
SN/T 4675.22
SN/T4675.23
SN/T4675.24
SN/T 4675.25
SN/T4675.26
SN/T 4675.27
出口葡萄酒中甘油的测定酶法；出口葡萄酒中2,3-丁二醇的测定气相色谱法；出口葡萄酒中乙醇稳定碳同位素比值的测定；出口葡萄酒中乳酸的测定酶法；出口葡萄酒中有机酸的测定离子色谱法；出口葡萄酒中葡萄糖、果糖和蔗糖的测定；出口葡萄酒中乙醛的测定气相色谱-质谱法：出口葡萄酒中5-羟甲基糖醛的测定液相色谱法；出口葡萄酒中二甘醇的测定气相色谱-质谱法：SN/T4675.17—2016
出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱质谱/质谱法：出口葡萄酒中7种花色苷的测定超高效液相色谱法：出口葡萄酒中溶菌酶的测定液相色谱法；出口葡萄酒中2,4，6-三氯苯甲醚残留量的测定；出口葡萄酒中纳他霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法；出口葡萄酒中水杨酸、脱氢乙酸和对氯苯甲酸的测定液相色谱法出口葡萄酒中富马酸的测定液相色谱-质谱/质谱法：出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法：出口葡萄酒中二硫代氨基甲酸酯残留量的测定顶空气相色谱法：出口葡萄酒中钠、镁、钾、钙、铬、锰、铁、铜、锌、砷、硒、银、镉、铅的测定；出口葡萄酒中稀土元素的测定电感耦合等离子体质谱法；出口葡萄酒中可溶性无机盐的测定离子色谱法；出口葡萄酒中总二氧化硫的测定比色法；出口葡萄酒及葡萄汁中氨氮的测定连续流动分析仪法；出口葡萄酒福林-肖卡指数的测定分光光度计法；出口葡萄酒颜色的测定
CIE1976（Lab）色空间法：
出口葡萄酒浊度的测定散射光法；出口葡萄酒碱性灰分的测定；
SN/T4675.28
出口葡萄酒细菌、霉菌及酵母的计数：SN/T 4675.29
出口葡萄酒中酒香酵母检验实时荧光PCR法；SN/T4675.30出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验实时荧光PCR法。本部分为SN/T4675的第17部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国广东出人境检验检疫局。
本部分主要起草人：崔宗岩、葛娜、刘晓茂、高飞、王飞、钱云开、李响、钟亚莉、王海洋、周乐、杨迪、李学民、曹彦忠、刘青、李志勇。1
1范围
出口葡萄酒中丁基锡含量的测定气相色谱-质谱/质谱法
SN/T4675.17—2016
SN/T4675的本部分规定了出口葡萄酒中丁基锡含量测定的气相色谱-质谱/质谱法。本部分适用于葡萄酒中一丁基锡、门本场科
厂基锡含量的测定。
本部分包含两种样品前处理方法：第一法：液液萃取法，第二法：固相微萃取法。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法第一法液液萃取法
3方法提要
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液中进行乙基化衍生，经二氯甲烷液液分配萃取，佛罗里土柱固相萃取净化，正已烷洗脱，浓缩后进行气相色谱-质谱/质谱分离和检测，内标法定量。
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水4.1冰酷酸，优级纯。
醋酸钠。
4.3四氢呋喃，色谱纯。
甲醇，色谱纯。
正已烷，色谱纯。
二甲烷·色谱纯。
无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，贮存于密封容器中备用。醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc)缓冲溶液（0.2mol/L）：采用适量冰醋酸（4.1)和醋酸钠（4.2)及超纯水配4.8
制，调节pH=4.5。
4.9四乙基硼化钠标准品（Sodiumtetraethylborate，简写NaBEt，分子式：C，H2.BNa，CAS号1552324-7）：纯度≥98%。
4.10四乙基硼化钠储备液（20%，质量体积比）：取四乙基硼化钠标准品（4.9）1.0g，在冰水浴条件下溶解于5ml四氢呋喃（4.3）中，混合均匀，置于冰箱一20℃保存。4.11四乙基硼化钠工作液（2%，质量体积比），四乙基硼化钠储备液（4.10）用超纯水稀释获得。每工1
SN/T4675.17-2016
作日现用现配。
注：VaBEt在空气中容易氧化而降低衍生效率，因而其母液要配置于四氢哺溶液中，并在冰箱中冷冻保存。工作液每工作日现用现配。
一丁基锡标准品（Monobutyltintrichloride，MBT，C,H,SnCls，CAS号1118-46-3）：纯度≥97%。4.12
3二丁基锡标准品（Dibutyltindichloride，DBT，C，HSnClz，CAS号683-18-1）：纯度≥97.2%。4.13
三丁基锡标准品（Tributyltinchloride，TBT，CHSnCl,CAS号1461-22-9）：纯度≥97%。4.15
三丙基锡标准品（Tripropyltinchloride.TPrT，C，HzSnCl,CAS号2279-76-7）：纯度≥95%。4.16标准储备液：准确称取适量一丁基锡、二丁基锡、三丁基锡和三丙基锡标准品，分别用甲醇（4.4）配制成1000μg/mL（以锡计）的标准储备液，一20℃条件下保存。4.17标准工作液：根据检测要求用超纯水用标准储备液（4.16）稀释成1μg/mL（以锡计）的标准工作溶液，4℃条件下保存。
4.18佛罗里硅土（Florisil)固相萃取柱：1g/6mL或相当者，柱内装填高度约1cm的无水硫酸钠（4.7），使用前预先用6mL正已烷（4.5）活化，仪器和设备
5.1气相色谱-质谱/质谱仪：配有电子轰击离子源（EI）。5.2振荡器。
5.3电子天平：感量0.1mg和10mg。5.4离心管：50ml.
旋转蒸发器。
低速离心机：3000r/min。
氮吹仪。
固相萃取装置。
6测定步骤
试样制备
非起泡酒样品可以直接测定；起泡酒需预先脱气，将100IⅡL试样倒入带排气塞的瓶中，在室温下使用水平振荡器或超声波水浴脱气，直至无气泡逸出。6.2
2衍生和提取
称取5.0g均勾葡萄酒样品（精确到0.01g）于50mL离心管（5.4）中，向其中加人内标三丙基锡工作液（4.17)100μL，混勾后继续加人5.0mLHAc-NaAc缓冲溶液（4.8）、50μL四乙基硼化钠工作液（4.11）和20mL二氯甲烷（4.6）溶液，在振荡器（5.2）上震荡萃取30min。在3000r/min下离心3min取上清液于150ml浓缩瓶中。残液中再次加人二氯甲烷20mL重复萃取并合并提取液，于35℃水浴中减压浓缩至近干。向其中加入约2mL正己烷溶解残渣，待净化。6.3净化
将Florisil固相萃取小柱（4.18)安装在固相萃取装置（5.8）上，活化后将上述浓缩的提取液全部转移至Florisil柱上，分两次分别用1mL正已烷清洗衍生液，并待Florisil柱中溶液的液面降至无水硫酸钠层时，将其转移至柱上。再用10ml.正已烷溶液洗脱，控制流速小于等于3mL/min，收集全部流出液，35℃氮吹浓缩至1mL以下，用正已烷定容至1mL，供气相色谱质谱/质谱测定和确证。2
-TKAONTKAca
6.4标准溶液的制备
SN/T 4675.17—2016
取适量标准工作溶液（4.17），加入超纯水稀释混匀使其总体积为5mL。按照与样品相同的方法进行衍生，提取和净化。
6.5气相色谱-质谱/质谱参考条件a)
色谱柱：石英毛细管柱DB-1701，（30m×0.25mm×.0.25μm）或相当者；色谱柱温度：初始温度50℃，保持1min，以30℃/min升至290℃，保持6min；进样口温度：290℃；
色谱-质谱接口温度：280℃
离子源温度：230℃；
载气：氮气，纯度≥99.999%；
进样量：1.0μL；
进样方式：无分流进样，1min后打开分流阀；电离方式：EI,70eV；
测定方式：多离子反应监测模式（MRM），具体条件见表1；溶剂延迟：4.5min。
表1三种丁基锡及内标三丙基锡的乙基化衍生产物的MRM条件化合物
TPrT(IS)
注：TS内标
保留时间/min
6.6色谱测定与确证
定量离子对（碰撞能量/eV）
179>151(5)
193151(5)
263>207(5）
291>235(5)
辅助定性离子对（撞能量/eV）
179123(10)
193>123(10)
263≥151(10)
291≥179(10)
根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准溶液，对标准溶液与样液等体积参插进样测定，标准溶液和待测样液中丁基锡衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准溶液的MRM色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，并且在扣除背景之后的质量色谱图中，所选离子（见表1）均出现，所选离子丰度比与标准品对应离子丰度比，其值在允许范围内（见表2），则目标物确定检出。在上述色谱条件下，三种丁基锡及内标三丙基锡的乙基化衍生产物的保留时间见表1。四种衍生物的气相色谱-质谱/质谱的MRM色谱图和质谱图参见图A.1~图A.5。表2气相色谱-质谱定性确证时相对离子对丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
允许的相对偏差/%
6.7空白试验
除不加试样外，均按照上述测定步骤进行。>20~50
>10~20
rKAoNrKAca
SN/T4675.17—2016
7结果计算和表述
用色谱数据工作站或按照式（1）计算试样中丁基锡化合物的含量，计算结果需扣除空白值，结果保留2位有效数字，计算结果均以锡计，如果转化为以丁基锡离子形式计，一丁基锡（C,H，Sn+）、二丁基锡（CgHSn2+）和三丁基锡（CzHzSn*）换算系数分别为：1.48，1.95和2.43。X
式中：
C XAXCXAXVXI000
A.XCXAXmX1000
试样中被测物含量，单位为微克每于克（ug/kg.以锡计）标准液中被测物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL，以锡计）：试样溶液中被测物的色谱峰面积：标准溶液中被测物的色谱峰面积试样溶液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/ml，以锡计）；标准液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升（ng/ml，以锡计)；标准溶液中内标物的色谱峰面积：试样溶液中内标物的色谱峰面积：样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：最终样液所代表的试样量，单位为克（g）定量限、回收率和精密度
定量限
本方法中3种丁基锡化合物的定量限均为2.0ug/kg.以锡计。8.2回收率
.（1)
采用液液萃取和气相色谱-质谱/质谭法进行检测，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表3。8.3精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的15%。表3代表性样品基质在不同添加浓度下的回收率和精密度数据（液液萃取法，n=6）添加水平
典型基质
红葡萄酒
(以锡计）
丁基锡
三丁基锡
回收率范围相对标准偏差
回收率范围
相对标准偏差
71.0--91.8
80.2-93.4
89.3~-100.4
71.8-89.1
81.3~95.0
82.7~95.9
89.3~99.8
三丁基锡
回收率范围
84.3~97.7
87.8~~98.8
相对标准偏差
KAoNrKAca
添加水平
典型基质
白葡萄酒
桃红葡
9方法提要
（以锡计）
μg/kg
一丁基锡
回收率范围
70.7~87.5
80.3~94.0
87.7~~97.5
90.4-~100.4
70.9~86.6
86.2~101.2
92.2102.8
表3（续）
相对标准偏差
丁基锡
回收率范围
74.0~90.6
78.1~-92.2
84.1~-96.6
88.1~96.4
71.1~86.4
80.5--95.9
92.6~97.4
固相微萃取法
相对标准偏差
SN/T 4675.17—2016
三丁基锡
回收率范围
71.9~91.4
84.0~~97.6
88.3~-101.6
92.9~100.2
74.7--89.2
84.3~97.6
88.6-~103.3
相对标准偏差
葡萄酒样品中的丁基锡化合物在HAc-NaAc缓冲溶液中进行乙基化衍生，同时在磁力搅拌条件下进行项空固相微萃取，完成后萃取纤维直接插人气相色谱进样口进行解析、分离和检测，内标法定量。10试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的
一级水
冰醋酸，同4.1。
醋酸钠，同4.2。
四氢呋喃，同4.3
醋酸-醋酸钠（HAc-NaAc)缓冲溶液，同4.8。四乙基硼化钠，同4.9。
四乙基硼化钠储备液（20%，质量体积比），同4.10。四乙基硼化钠工作液（2%、质量体积比），同4.11。丁基锡标准品，同4.12。
二丁基锡标准品，同4.13。
三丁基锡标准品，同4.14。
三丙基锡标准品，同4.15。
标准储备液，同4.16。
标准工作液，将第一法中的标准溶液（4.17）用超纯水稀释至终浓度为100ng/mL（以锡计），现用现配。
IKoNKca
SN/T4675.17—2016
仪器和设备
气相色谱-质谱/质谱仪，同5.1。电子天平，同5.3。
手动固相微苯取装置。
固相微萃取纤维，表面涂层为100μm聚二甲基硅氧烷（PDMS）。11.4
顶空瓶，50mlL。
磁力搅拌器，配置磁子。
测定步骤
固相微萃取
称取5.0g均勾葡萄酒样品（精确到0.01g）于50mL顶空瓶（11.5）中，向其中加人内标三丙基锡工作液（10.13)50μL，混匀后继续加人20.0mLHAc-NaAc缓冲溶液（10.4）、50μL四乙基硼化钠工作液（10.7）和聚四氟磁子，将固相微萃取装置（11.3）固定在顶空瓶上，伸出萃取纤维于顶空环境中，在900r/min条件下磁力搅拌20min。之后立即取出纤维，插人气相色谱进样口进行解析、分离和检测。解析时间为1min。
2标准溶液的制备
取适量标准工作溶液（10.13），加人超纯水稀释混勾，使其总体积为5mL。按照与样品相同的处理方法（12.1）进行固相微萃取和气相色谱-质谱/质谱检测。12.3气相色谱-质谱/质谱参考条件同6.5。
色谱测定与确证
同6.6。
12.5空白试验
同6.7。
结果计算和表述
同第7章。
定量限、回收率和精密度
14.1定量限
本方法中3种丁基锡化合物的定量限均为0.050μg/kg，以锡计。14.2回收率
采固相微萃取和气相色谱-质谱/质谱法进行检测，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表4。6
rKAoNirKAca
精密度
SN/T4675.17—2016
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的20%。表4代表性样品基质在不同添加浓度下的回收率数据（固相微萃取法，n=6）添加水平
典型基质
红葡萄酒
白葡萄酒
桃红葡
（以锡计）
—丁基锡
回收率范围
64.3~95.4
73.1~90.4
74.4-~94.6
86.7-~105.3
61.7~96.9
73.9~95.2
77.6~102.6
83.5~113.4
74.1~95.6
75.2~95.8
81.2~-96.4
相对标准偏差
二丁基锡
回收率范围
71.2-90.3
79.2~98.4
87.8~102.3
69.8~99.6
73.4~94.6
87.9~105.4
66.4~-92.1
79.4~~100.6
97.5-~114.1
相对标准偏差
三丁基锡
回收率范围
67.3-96.5
75.6~98.2
87.2~102.4
75.6103.5
79.2~95.9免费标准bzxz.net
76.2~96.6
85.7~109.9
80.1-102.5
84.3-97.6
88.9-106.8
相对标准偏差
SN/T 4675.17—2016
附录A
（资料性附录）
一丁基锡、三丙基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物的（MRM）色谱图和质谱图丁基锡、三内基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物的（MRM）色谱图和质谱图见图A.1~图A.5。
20150307-BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100
20150307-BTStd-100ul
20150307-BT-Std-100ul
20150307-BT-Std-100μl
4.804.905.005.10m
TTTTTT
20150307BT-Std-100 μl
20150307-BT-Std-100 μl
575580585
1:MRM of2 Channels EI+
179>151(MBT)
1:MRMof2ChannelsEl+
179>23(MBT)
2:MRM of 2 Channels EI+
193>151(TPrT）
2:MRMof2ChannelsEI+
193>123(TPrT)
3:MRMof2Channels EI+
263>207(DBT)
3:MRMof2ChannelsEI+
263>151(DBT)
4:MRM of2ChannelsEI+
291>235(TBT)
4:MRM of 2 Channels EI+
291>179(TBT
图A.1一丁基锡、三丙基锡、二丁基锡和三丁基锡的乙基化衍生产物（一丁基三乙基锡、三丙基乙基锡、二丁基二乙基锡和三丁基乙基锡）的（MRM）色谱图（标准添加浓度为20μg/kg，以锡计）8
5667718283
8491111
189201
一丁基锡乙基化衍生物
135139
1571738285 110
171185
SN/T4675.17—2016
264269281283297309 324 341343349m/
丁基三乙基锡的质谱图
212227
135426928128429731332327383413432604
三丙基锡乙基化衍生产物三丙基乙基锡的质谱图9
SN/T4675.172016
92.1113.0
二丁基锡乙基化衍生产物二丁基二乙基锡的质谱图207
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173181
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三丁基锡乙基化衍生产物三丁基乙基锡的质谱图hm/=
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小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。