SN/T 4558-2016.Determination of cyhexatin (azocyclotin) and fenbutatin oxide in foods for export.
1范围
SN/T 4558规定了出口食品中三环锡(三唑锡)和苯丁锡含量的气相色谱质谱法和气相色谱法。
SN/T 4558适用于苹果、柑橘、萝卜、板栗、猪肉、猪肝、贝肉、大米、茶叶和蜂蜜等基质中三环锡(三唑锡)和苯丁锡含量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法原理
试样经盐酸四氢呋喃消解后,其中残留的三环锡和苯丁锡用正已烷进行提取，提取液经浓缩后与乙基溴化镁进行衍生化反应,衍生物经佛罗里硅土固相萃取柱净化,洗脱液浓缩定容后供气相色谱和气相色谱-质谱测定和确证，外标法定量。
4试剂和材 料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1盐酸,优级纯。
4.2四氢呋喃。
4.3正己烷，色谱纯。
4.4丙酮，色谱纯。
4.5浓硫酸 ,浓度98%,p约为1.84.
4.6无水 硫酸钠:经650℃灼烧4 h,冷却后贮存于密封容器中备用。
4.7乙 基溴化镁四氢呋喃溶液(1.0 mol/L)。乙基溴化镁属于格氏试剂,该试剂遇水剧烈反应,严重会发生爆炸或起火,其储存条件应置于干燥器中密闭保存,取用过程中要严格防止其与水接触,并且在通风设备中进行操作。此外,该试剂在空气中容易氧化而使其衍生效率下降,因而要干燥密闭保存。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4558—2016
代替SN0150—1992,SN/T1990—2007出口食品中三环锡（三唑锡）和苯丁锡含量的测定
Determination of cyhexatin (azocyclotin) and fenbutatin oxide infoodsforexport
2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
创添品查真信
2017-03-01实施
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草本标准代替SN0150—1992和SN/T1990—2007。SN/T4558——2016
本标准与SN01501992《出口水果中三唑锡残留量检验方法》和SN/T1990一2007《进出口食品中三唑锡和三环锡残留量的检测方法气相色谱-质谱法》的主要技术变化如下：标准名称由《出口水果中三唑锡残留量检验方法和《进出口食品中三唑锡和三环锡残留量的检测方法气相色谱-质谱法》统一整合为《出口食品中三环锡（三唑锡）和苯丁锡含量的测定》；
检测目标物将三环锡和三唑锡进行了统一，增加了苯丁锡；检测方法分为第一法：气相色谱-质谱法和第二法：气相色谱法：扩大标准检测对象的适用范围：由原来的“柑橘、香蕉、茶叶、苹果鱼肉、猪肝等”扩大至“苹果、柑橘、萝卜茶叶和蜂蜜等”；一使用“乙基漠化镁”作为化衍生试剂代替原来的“甲基碘化镁”。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、中华人民共和国陕西出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：崔宗岩、李建华、刘雪杉、何强、葛娜、刘永明、孔祥虹、庞国芳、曹彦忠。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN0150—1992;
—SN/T1990—2007。
1范围
出口食品中三环锡（三唑锡）和苯丁锡含量的测定
SN/T4558—2016
本标准规定了出口食品中三环锡（三唑锡）和苯厂锡含量的气相色谱-质谱法和气相色谱法。本标准适用于苹果、柑橘、萝卜、板栗、猪肉、猪肝、贝肉、大米、茶叶和蜂蜜等基质中三环锡（三唑锡）和苯丁锡含量的测定。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法原理
试样经盐酸-四氢喃消解后，其中残留的三环锡和苯丁锡用正已烷进行提取，提取液经浓缩后与乙基溴化镁进行衍生化反应，衍生物经佛罗里硅土固相萃取柱净化，洗脱液浓缩定容后供气相色谱和气相色谱质谱测定和确证，外标法定量。气相色谱-质谱法
第一法
4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1
盐酸，优级纯。
四氢呋喃。
正已烷，色谱纯。
丙酮，色谱纯。
浓硫酸，浓度98%，p约为1.84。4.6无水硫酸钠：经650℃灼烧4h，冷却后贮存于密封容器中备用。乙基溴化镁四氢呋喃溶液（1.0mol/L）。乙基溴化镁属于格氏试剂，该试剂遇水剧烈反应，严重会4.7
发生爆炸或起火，其储存条件应置于干燥器中密闭保存，取用过程中要严格防止其与水接触，并且在通风设备中进行操作。此外，该试剂在空气中容易氧化而使其衍生效率下降，因而要干燥密闭保存4.8盐酸-四氢呋哺（1+20，体积比）溶液：用量筒量取5.0mL盐酸，加入试剂瓶中，然后向其中缓缓加入100mL四氢呋嘴溶液，轻轻摇勾备用。4.9正已烷-丙酮（99+1，体积比）溶液：试剂瓶中加人99mL正已烷溶液，然后向其中加人1mL丙酮，轻轻摇匀备用。
4.100.5mol/L硫酸溶液：取500mL去离子水，用量筒取14.3mL浓硫酸，缓慢加人去离子水中，混SN/T4558—2016
匀备用。
安全警示一一浓硫酸遇水大量放热，配制过程中要将浓硫酸在玻璃棒引流条件下缓慢加入去离子水中，并且边加边搅拌，操作要在冷水浴条件下进行，防止溶液爆沸危害操作人员健康。4.11三唑锡标准品（Az0cyclotin，C2.HN.Sn，CAS号41083-11-8）：纯度大于或等于98%。2三环锡标准品（Cyhexatin，CiHa.OSn，CAS号13121-70-5）：纯度大于或等于97%。4.12
4.13苯丁锡标准品（FenbutatinOxide，C6HOSn2+CAS号13356-08-6）：纯度大于或等于99.5%。4.14标准储备液：准确称取适量三唑锡、三环锡和苯丁锡标准品，分别用丙酮配制成100μg/mL的标准储备液。标准储备液在一18℃条件下保存。4.15标准工作液：根据检测要求用丙酮稀释成相应标准工作溶液。标准工作液在4℃条件下保存。4.16
佛罗里硅土（Florisil)固相萃取程u80
仪器和设备
气相色谱-质谱仪：配有电子轰击离子源（EI）5.2组织捣碎机。
3高速均质器。
5.4电子天平：感量0.0001g和0.01g。5.5
离心管：50mL
5.6超声波清洗机。
5.7振荡器。
3旋转蒸发器。
低速离心机：转速不低于3000r/min氮吹仪。
固相萃取装置，
6试样制备与保存
试样制备
水果和蔬菜类
取苹果、柑橘、萝卜等水果或蔬菜样品500g，取其可食用部分切碎后，用碎机将样品加工成浆状。混匀，装入洁净的样品袋内，密闭并标明标记。6.1.2茶叶及粮谷类
取茶叶、大米等有代表性样品500g，用粉碎机粉碎并通过孔径2.0mm圆孔筛，混勾，装人洁净的样品袋内，密闭并标明标记。
6.1.3肉及肉制品
取猪肉、猪肝等代表性样品500g，用捣碎机粉碎成浆状，混匀，装入洁净的样品袋内，密闭并标明标记。
6.1.4蜂蜜
取代表性均匀样品500g，装入洁净的样品袋内，密闭并标明标记2
KAoNKAca
6.2试样保存
SN/T4558—2016
茶叶、粮谷、蜂蜜等试样于4℃条件下冷藏保存；水果、蔬菜和肉及肉制品等试样于一18℃条件下冷冻保存。
在制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留含量的变化。7测定步骤
7.1提取
对于固态样品，如苹果、柑橘、板栗、大米、牛肉猪肉、猪肝等，称取均勾试样5.0g（精确到0.01g）于60mL离心管中，加入10mL盐酸-四氧味喃溶液（4.8），剧烈震荡2min，放置1h。加入20mL正己烷，均质1min后震荡提取45min，在3000r/min下离心3min，取上清液于150mL浓缩瓶中。残渣中再次加人正已烷20mL，震荡提取15min，合并提取液，于35水浴中减压浓缩至近干。向浓缩瓶中加人约2mL正己烷溶解残渣，待衍生。对于液体样品如蜂蜜等，称取5.0g均匀试样（精确到0.01g）于60mL离心管中，加入10ml.去离子水溶解样品，然后加人10mL盐酸四氢峡溶液，剧烈震荡2min。加入20mL正已烷，震荡提取45min.在3000r/min下离心3min，取上清液士150mL浓缩瓶中。残渣中再次加人正已烷20mL，震荡提取15min，合并提取液，于35℃水浴中减压浓缩至近干：向其中加人约2mL正已烷溶解残渣，待衍生。
7.2衍生化
向上述正已浓缩液（7.1）中加人2ml乙基溴化镁溶液（4.7），密闭瓶塞，手动振摇试剂瓶，使瓶内样液混合均匀，然后在30℃条件下超声反应15min。在冷水浴条件下向其中逐滴加人5mL0.5mol/L稀瓦塞后剧烈震荡使固体残渣完全溶解。将溶解液转移至10mL离
硫酸溶液，边滴加边手动振摇。密闭瓶心管中，在3000r/min下离心5min7.3净化
将Florisil固相萃取小柱（柱内填约1cm的无水硫酸钠）安装在固相萃取的真空抽滤装置上，先用6mL正已烷预淋洗小柱。将上述衍生的上层有机相（7.2）全部转移至Florisil柱上，分两次分别加人1mL正已烷洗涤衍生液，并待Florisil杆中溶液的液面降至无水硫酸钠层时，将其转移至柱上。再用10mL正已烷-丙酮溶液进行洗脱（4.9），控制流速小于或等于3mL/min，收集全部流出液，35℃水浴条件下用氮气吹干，用正已烷溶解并定容至1mI，供气相色谱-质谱测定和确证。7.4标准溶液的制备
取适当浓度的系列标准工作溶液各1.0mL，用氮气将丙酮吹干，再加人2mL正已烷溶解，按照与样品相同的方法进行衍生化（7.2)和净化（7.3）。7.5测定
7.5.1气相色谱-质谱参考条件
气相色谱-质谱参考条件如下：
色谱柱：石英毛细管柱DB-1701，（30m×0.25mmX0.25μm）或相当者；a）
色谱柱温度：初始温度50℃，保持1min，以30℃/min升至290℃，保持10min；b)
c）进样口温度：290℃；
KAoNiKAca
SN/T4558—2016
色谱-质谱接口温度：280℃；
离子源温度：230C：
载气：氢气，纯度≥99.999%，
柱流量：1.5mL/min；
进样量：1.0mL
进样方式：无分流进样，1min后打开分流阀：电离方式：EI，70eV
测定方式：选择离子监测方式（SIM）；1)
监测离子（m/）：三环锡（三唑锡）监测离子（m/z）：233，151，315，121；苯丁锡监测离子(m/z)：415,197,519,253;
m）溶剂延迟：8.0min。
7.5.2色谱测定与确证
根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液中三环锡（三唑锡）和苯丁锡的衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，则根据选择离子种类及其丰度比进行确证。样品中被测物质的相对离子丰度与浓度相当标准工作溶液的相对离子丰度比进行比较，相对丰度允许相对偏差不超过表1规定的范用，则可确定样品中存在对应被测物。在上述气相色谱-质谱条件下，三环锡衍生物的参考保留时间为9.87min，监测离子（m/α）丰度比为233：151：315：121=100：69：52：33，苯丁锡衍生物的参考保留时间为17.66min，监测离子（m/z）丰度比为415：197：519：253-100：56：22：13。三环锡和苯丁锡的衍生物的气相色谱质谱的选择离子色谱图和质谱图参见图A1图A.3。表1气相色谱-质谱定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
允许的相对偏差/%
7.6空白试验
除不加试样外，均按照上述测定步骤进行。8结果计算和表述
>20~50
>10~20
环锡（三唑锡）测定结果以三环锡计。若以三唑锡计时将三环锡含量乘以换算系数1.13。用色谱数据工作站或按照式（1）计算试样中三环锡（三唑锡）或苯丁锡的含量，计算结果需扣除空白值，计算结果保留两位有效数字：A,Xc×V
式中：
试样中被测物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；试样中被测物衍生物的色谱峰面积；标准工作液中被测物的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；..1)
TKAoNKAca
标准工作液中被测物衍生物的色谱峰面积；最终样液所代表的试样量，单位为克（g）。测定低限、回收率
测定低限
SN/T4558—2016
本方法中三环锡（三唑锡）的测定低限为0.020mg/kg，苯丁锡的测定低限为0.050mg/kg。回收率
采用气相色谱-质谱法测定，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表22GC-MS法样品的添加浓度及回收率的实验数据表2
样品名称
三环锡添加浓度
三环锡回收率范围
76.5-96.5
81.6~97.2
77.0~96.0
77.2~98.3
83.9~94.2
79.5-97.5
77.3-~96.3
86.3-~102.1
79.5~96.5
86.5100.8
77.5~-101.0
89.5106.5
86.7105.6
81.5102.5
77.2598.0
83.6~102.3
78.5~96.0
84.8102.0
88.3~97.2
79.5~100.5
81.8~98.8
茉丁锡添加浓度
茉丁锡回收率范图
75.6-~98.4
85.5~100.7
75.6~-96.4
78.1~-95.0
80.5~~96.9
77.1-101.6
76.5~97.4
81.6--96.2
87.0100.3
73.4~98.4
78.9-95.6
79.5~95.2
79.6~98.6
75.7~-94.4
81.9~~97.2
78.9~100.6
82.63~101.3
85.0~99.4
-TTKAONKAca
SN/T4558-—2016
样品名称
10试剂和材料
三环锡添加浓度
同第一法（第4章）。
仪器和设备
表2（续）
三环锡回收率范围
77.5~-95.0
79.8~-97.8
82.1~97.4
83.5-~99.0
86.1103.2
苯丁锡添加浓度
第二法气相色谱法
气相色谱仪：配置火焰光度检测器（FPD），配有硫滤光片11.2
组织捣碎机。
高速均质器。
电子天平：感量0.000
01g和0.01g
离心管：50mL。
超声波清洗机。
振荡器。
旋转蒸发器。
低速离心机：3000r/mm
氮吹仪
固相萃取装置。
试样制备与保存
同第一法（第6章）。
13测定步骤
13.1提取
同第法（7.1）。
苯丁锡回收率范围
79.4~95.7
79.8~96.2
86.2~98.2
-TKAONIKAca
13.2衍生化
同第一法（7.2）。
13.3净化
同第一法（7.3）。
13.4标准溶液的制备
同第一法（7.4）。
13.5气相色谱参考条件
气相色谱条件如下：
色谱柱：石英毛细管柱DB-1
0.25mmX0.25um）或相当者；
SN/T4558—2016
色谱柱温度：初始温度50℃，保持1min，以30℃/min升至290℃，保持10min；进样口温度：290℃；
载气：氮气，纯度≥99.999%
柱流量：1.5mL/min；
进样量：1.0uL;
进样方式：无分流进样
羊.1min后打开分流阀；
检测器温度：250℃；
燃烧气及流量：氢气，75mL/min，空气7513.6色谱测定
根据样液中被测物含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液中三唑锡）和茉丁锡的衍生物的响应值均应在仪器检测的线环锡（
性范围内。如果样液与标准工作溶液的色谱图中，在相同保留时间有色谱峰出现，则认为样品中存在对应被测物。在上述气相色谱条件下三环锡衍生物的参考保留时间为9.57min，苯丁锡衍生物的参考保留时间为15.67min。三环锡和苯丁锡的衍生物的气相色谱图参见附图B。13.7空白试验
除不加试样外，均按照上述测定步骤进14
结果计算和表述
同第一法（第8章）。计算结果保留两位有效数字。测定低限、回收率
15.1测定低限
本方法中三环锡（三唑锡）的测定低限为0.10mg/kg，苯丁锡的测定低限为0.50mg/kg。15.2回收率
采用气相色谱-质谱法测定，样品的添加浓度及回收率的实验数据见表3。SN/T4558—2016
样品名称
GC-FPD法样品的添加浓度及回收率的实验数据三环锡添加浓度
三环锡回收率范围
88.4~97.5
77.1~91.0
82.3~94.6
89.1--100.8
78.1~96.2
82.5~100.3
78.6~90.8
87.6~100.6
78.8-89.9
87.5~97.6
78.3~91.1
90.2-100.7
78.0~99.1
85.1~97.1
80.2~97.9
84.9100.9
75.4~87.2
86.4~97.2
苯丁锡添加浓度
苯丁锡回收率范围
79.1~-93.6
89.2100.5
78.2~96.7
80.4~-94.9
87.0~99.5
74.4~92.1
87.6~101.4
77.0~98.7
77.1~88.2
86.9~99.2
71.1~96.7
76.1-93.2此内容来自标准下载网
83.6~100.7
76.9~95.3
76.5~95.1
78.2~96.2
82.5~-92.6
85.8~99.2
83.2~99.8
86.3-98.4
81.1~95.2
81.9~93.5
88.7~100.5
附录A
（资料性附录）
SN/T4558—2016
三环锡（三唑锡）和苯丁锡衍生物的选择离子（SIM)色谱图和质谱图三环锡（三唑锡）和苯工锡衍生物的选择离子（SIM色谱图和质谱图见图A.1～图A.3。100-
兰环锡
苯丁锅
三环锡（三唑锡）衍生物三环己基乙基锡和苯丁锡衍生物三（2-甲基-2-苯基丙基）乙基锡的选择离子（SIMD流图
SN/T4558—2016
117133
1197135
三环锡（三唑锡）衍生物三环已基乙基锡的质谱图S
20211249
273301
100120140160180200220240
1386209
380m/400m/
510520
260280300320340360380400420440460480500520540苯丁锡衍生物三（2-甲基-2-苯基丙基）乙基锡的质谱图
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。