SN/T 3122-2012.Test method for antibacterial capability of inorganic antibacterial agents.
1范围
SN/T 3122规定了无机抗菌材料抗菌性能的测定试验方法。
SN/T 3122适用于薄膜型无机抗菌材料和粉体型无机抗茵材料抗菌性能的测定。
2规范性引 用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB 4789.2食 品安全国家标准食品微生物学检验茵落 总数测定
GB/T 6679固体 化工产品采样通财
GB 19489实验室生物安全通用要求
3方法提要
薄膜型无机抗菌材料:本方法通过定量接种细谐于待检验样品土,用贴膜的方法使细菌均匀接触样板,经过一定时间的培养后,检测样品中的活菌数;并计算出样品的杀菌率。
粉体型无机抗菌材料:在规定的条件下,利用菌落计数法测危原始菌液经粉体型无机抗菌材料处理后的活菌数,计算杀菌率。
4术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
4.1抑菌bacteriostasis
具有抑制细菌或真菌等微生物生长繁殖及其活性的作用。
4.2杀菌sterilization
具有杀灭细菌或真菌生长繁殖的作用。
4.3抗菌antibacterial
具有杀灭或抑制细菌或真菌生生繁殖及其活性的作用。
4.4无机抗菌材料inorganic antibacterial agents
具有抗菌作用的无机材料。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T3122-—2012
无机抗菌材料抗菌性能试验方法Test method for antibacterial capability of inorganic antibacterial agents2012-05-07发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2012-11-16实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出人境检验验疫局、东北大学。本标准主要起草人：姜莉、刘奎仁、耿庆华、韩庆、张明、张震宇、钟钰、李成铺。SN/T3122—2012
1范围
无机抗菌材料抗菌性能试验方法本标准规定了无机抗菌材料抗菌性能的测定试验方法。本标准适用于薄膜型无机抗菌材料和粉体型无机抗菌材料抗菌性能的测定。2规范性引用文件
SN/T3122—2012
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验茵落总数测定GB/T6679固体化工产品采样通购实验室生物安全通用要求
GB19489
3方法提要
薄膜型无机抗菌材料：本方法通过定量接种细凿于待检验样品土，用贴膜的方法使细菌均匀接触样板，经过一定时间的培养后，检测样品中的活菌数，并计算出样品的杀菌率。粉体型无机抗菌材料：在规定的条伸下，利用菌落计数法测定原始菌液经粉体型无机抗菌材料处理后的活菌数，计算杀菌率。
4术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。4.1
抑菌bacteriostasis
具有抑制细菌或真菌等微生物生长繁殖及其活性的作用，4.2
杀菌sterilization
具有杀灭细菌或真菌生长繁殖的作用。4.3
antibacterial
具有杀灭或抑制细菌或真菌生生繁殖及其活性的作用。4.4
无机抗菌材料inorganicantibacterialagents具有抗菌作用的无机材料。
5取样和制样
5.1取样和制样按GB/T6679规定进行。HiiKANiKAca
SN/T3122—2012
2薄膜型无机抗菌材料：将待测抗菌材料制备成50mm士2mm见方大小试样，制备9片，其中3片5.2
用于抗菌性能测试，3片用于初始对照组，3片用于阴性对照组。5.3粉体型无机抗菌材料：称取10mg粉体型抗菌材料溶于配制好的100mL生理盐水中，密封后以103kPa，121℃，高压蒸汽灭菌20min。6测定方法
6.1实验室要求
抗菌试验的实验室应符合GB19489规定的实验室生物安全管理和设施条件要求。6.2试剂和材料
6.2.1覆盖膜
聚乙烯薄膜，标准尺寸为（40士2)mm×（40士2）mm、厚度（0.05~0.10）mm。用70%乙醇溶液（乙醇：蒸馏水=70：30)浸泡10min，再用洗脱液冲洗，自然干燥。6.2.2培养基
培养基的成分及配制见附录A。
6.3仪器和设备
电热干燥箱。
高压灭菌器。
生化培养箱，实验菌种36℃土1℃恒温培养。6.3.3
超净工作台。
6.3.5电子天平，精度0.01g。
磁力揽拌器。
灭菌培养Ⅲ，内径90mm。
灭菌试管。
灭菌移液管。
接种环。
6.4试验条件
薄膜型无机抗菌材料
试验用标准菌种：革兰氏阴性大肠杆菌（Escherichiacoli）ATCC25922，革兰氏阴性肺炎克雷伯氏菌（Klesiellapneumoniae）ATCC70063，革兰氏阳性金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）ATCC6538。
注：根据产品的使用要求，可选用其他菌种或菌株作为试验用荫，但所有菌种或菌株应由国际微生物菌种保茂中心管理提供。
6.4.1.2初始菌液浓度：（1~9）×105CFU/mL。6.4.1.3
抗菌加工材料和非抗菌加工材料大小：50mm士2mm见方。4覆盖物大小：40mm士2mm见方。6.4.1.4
TiiKAoNiKAca
6.4.2粉体型无机抗菌材料
SN/T3122—2012
6.4.2.1试验用标准菌种：革兰氏阴性大肠杆菌（Escherichiacoli)ATCC25922，革兰氏阴性肺炎克雷伯氏菌（Klesiellapneumoniae）ATCC7oo63，革兰氏阳性金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）ATCC6538。
注：根据产品的使用要求，可选用其他菌种或菌株作为试验用菌，但所有菌种或菌株必须由国际微生物菌种保藏中心管理提供。
6.4.2.2初始菌液浓度：(1~9）×103CFU/mL。6.4.2.3粉体添加量：10mg。
6.5检测步骤
6.5.1薄膜型抗菌材料
灭菌方法如下：
a）干热灭菌：将涂有薄膜的瓷片、培养血、试管等放人电热干燥箱，调节温度至160℃后恒温灭菌2h。
高压灭菌：将培养基及枪头等放人高压灭菌锅，调节灭菌条件为121℃，103kPa后灭菌b）
20min~30min。
c）火焰灭菌：使用酒精灯对接种环，接种管口灭菌。6.5.1.2抗菌性能检测步骤如下：a）菌悬液制备：以蒸馏水500倍稀释营养肉汤，高压灭菌后作为稀释液使用。接种环火焰灭菌后，取一环斜面营养琼脂培养基上的菌种于装有稀释液的试管中，采取10倍稀释法将菌液稀释至适宜浓度[约（1～9）×105CFU/mL]，此即为实验用菌液。待测样品组：将待测抗菌材料平铺在已灭菌的培养Ⅲ中，吸取0.15mL的菌悬液滴于抗菌材b）
料，将40mm士2mm见方覆盖膜双盖之上，使菌悬液均匀覆盖在抗菌加工材料上，但不能超过薄膜边缘，盖上培养皿盖室温作用（如样品为光催化抗菌材料，则用普通日光灯光照）1h后进行活菌计数处理。
初始对照组：将待测抗菌材料接种菌液，覆盖膜覆盖之上后1min之内进行活菌计数处理。c
d）阴性对照组：将待测抗菌材料平铺在已灭菌的培养Ⅲ中，不接种菌液，覆盖膜覆盖上之后，盖上培养皿盖室温作用1h后进行活菌计数处理。活菌计数：以10mLSCDLP肉汤反复冲洗抗菌材料及覆盖物。将1ml洗液十9mL磷酸盐e)
缓冲液混后稀释10倍，吸取1mL至培养皿中，加人15mL~20mL平板计数琼脂（46℃~48℃）混勾，凝固后放人（36土1）℃生化培养箱中培养40h～48h，按GB4789.2的方法计数活菌数即平板内菌落数。
6.5.2粉体型无机抗菌材料
灭菌方法如下：
a）干热灭菌：将称量后的实验用粉体抗菌材料、培养皿、试管等放人干热灭菌器，调节温度至160℃后恒温灭菌2h。bzxz.net
高压灭菌：将培养基及枪头等放人高压灭菌锅，调节灭菌条件为121℃，103kPa后灭菌20min~30min。
火焰灭菌：使用酒精灯对接种环，接种管口灭菌。c）
抗菌性能检测步骤如下：
菌种活化：接种环火焰灭菌后，取一环斜面营养琼脂培养基上的菌种于平板培养基中，放人（36a)
iiKAoNiKAca
SN/T3122—2012
土1)℃生化培养箱中培养24h～48h后转接单一菌落于营养肉汤中继续培养16h~20h。b)
实验用菌液制备：取已灭菌的带胶塞试管采取10倍稀释方法将活化菌液稀释至适宜浓度约（1~4）×103CFU/mLJ.此即为实验用菌液。待测样品组：取1mL实验用菌液滴入到含有粉体的生理盐水中，放在磁力搅拌器上使其形成c）
悬浮液后室温作用（如样品为光催化抗菌材料，则用普通日光灯光照）1h后进行活菌计数处理，每个样品平行做3组。
初始对照组：取1mL实验用菌液滴入到含有粉体的生理盐水中，放在磁力搅拌器上使其形成悬浮液后，1min之内进行活菌计数处理，平行做3组。阴性对照组：取1ml生理盐水滴入到含有粉体的生理盐水中，放在磁力揽拌器搅拌均匀后室温作用1h后进行活薛计数处现平行做3组活菌计数：取作用后南液1ml.手已火菌的平Ⅲ中，将已灭菌的营养琼脂溶化冷却（46℃~f
48℃），按20μL：20bmL的比例加人定量的指示剂（见谢录A），倒人15ml~20mL营养琼脂于培养皿中混匀，凝固后放人（36土1>生化培养箱中路养24h后计数培养Ⅲ内菌落数。6.6质控要求
薄膜型无机抗菌材料初始对照纽的菌落数应（1-9）×10CFU/mL.粉体型无机抗菌材料初始对照组的菌落数应在（1～9）×10CFU/ml。阻性对照组应无菌生长，6.7结果计算
按式(1)计算：
式中：
待测样品的杀菌亲
一待测样品组平均回收菌落数，单位为荫落形成单位每注升（CFU/mL）；N
N。——-初始对照组平均回收醛落数，单位为菌落形成单位锌密升（CFU/mL)。6.8精确度
10个实验室对于5份粉体型光机抗菌材料对大肠葡杀菌率以及3份薄膜型无机抗菌材料对大肠杆菌和金色葡萄球菌杀菌率的方法精密度试验，其结见表√所示：表1
粉体型无机抗菌材料
薄膜型无机抗菌材料
荫种名称
大肠杆苗杀菌率
大肠杆荫杀菌率
金色葡萄球菌杀菌率
方法精密度
iiKAoNiKAca
A.1营养肉汤
牛肉提取物
蛋白陈
氯化钠
附录A
（规范性附录）
培养基的成分及配制
SN/T3122—2012
溶解于1000mL蒸馅水中，完全溶解后以氢氧化钠或盐酸调节H至7.07.2，高压灭菌。5℃~10℃保存备用。
A.2营养琼脂
牛肉提取物
蛋白陈
氯化钠
琼脂粉
溶解于1000mL蒸馏水中.完全溶解后以氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0~7.2，高压灭菌。5℃~10℃保存备用。
A.3平板计数用琼脂
酵母提取物
胰蛋白陈
葡萄糖
琼脂粉
溶解于1000mL蒸馅水中，完全溶解后以氧氧化钠或盐酸调节pH至7.0~7.2，高压灭菌。5℃~10℃保存备用。
A.4SCDLP肉汤
酪蛋白陈
大豆蛋白陈
氯化钠
磷酸氢二钾
葡萄糖
卵磷脂
溶解于1000mL蒸馏水中，加人7.0g表面活性剂吐温80。完全溶解后以氢氧化钠或盐酸调节pH至6.8~7.2。高压灭菌，5℃~10℃保存1个月。5
TiiKANiKAca
SN/T3122—2012
磷酸盐缓冲液
磷酸二氢钾
溶解于500mL蒸馏水，完全溶解后以氢氧化钠调节pH至6.8～7.2后再加水至1000ml。高压灭菌，5℃~10℃保存备用。
指示剂
2,3,5-三苯基氯化四氮唑
溶解于100mL灭菌蒸馏水.无菌过滤，5℃～10℃保存备用。生理盐水
氯化钠
溶解于1000mL蒸馏水中，高压灭菌，5℃10℃保存备用。6
HiiKANiKAca
SN/T3122-2012
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
无机抗苗材料抗菌性能试验方法SV/T3122—2012
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010)64275323
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印剧开本880×12301/16
2012年10月第一版
印张0.75
字数12千字
2012年10月第一次印刷
印数1-1600
书号：155066·2-24099
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