SN/T 4393-2015.Determination of quinolones in cosmetics for import and export-LC-MS/MS method.
1范围
SN/T 4393规定了化妆品中25种喹诺酮药物残留量的液相色谱串联质谱测定方法。
SN/T 4393适用于化妆水类、润肤膏类、面霜类和润肤乳液类化妆品中喹诺酮药物的定量测定和确证。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
采用酸性乙腈超声提取试样中的喹诺酮药物,含脂类样品以正己烷脱脂,提取液经浓缩、定容后,液相色谱-串联质谱仪检测和确证,外标法定量。
4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为优级纯,实验室用水采用GB/T6682规定的一级水。
4.1 乙腈:色谱纯。
4.2甲醇:色谱纯。
4.3甲酸:色谱纯。
4.4乙酸: 色谱纯。
4.5正己烷:色谱纯。
4.6 氯化钠:含量≥99.5%。
4.70.2%甲 酸的乙腈溶液:准确吸取2 mL甲酸(4.3),用乙腈定容至1 L,混匀。
4.80.1%甲 酸溶液:准确吸取1 mL甲酸,用水定容至1 L,混匀。
4.910%乙 腈的甲酸-水溶液(1 +9,体积比):量取10 mL乙腈(4.1)和90 mL 0.1%甲酸溶液(4.8)混匀。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4393—2015
进出口化妆品中喹诺酮药物测定液相色谱-串联质谱法
Determination of quinolones in cosmetics for import and export-LC-MS/MSmethod
2015-12-04发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
金层意真伪
2016-07-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草SN/T4393—2015
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：林黎、张毅、涂小珂、谢丽琪、岳振峰、康海宁、王宏菊、罗耀。1范围
进出口化妆品中喹诺酮药物测定液相色谱-串联质谱法
SN/T4393—2015
本标准规定了化妆品中25种喹诺酮药物残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于化妆水类、润肤膏类、面霜类和润肤乳液类化妆品中喹诺酮药物的定量测定和确证。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用丁本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要
采用酸性乙睛超声提取试样中的唑诺酮药物，含脂类样品以正已烷脱脂，提取液经浓缩、定容后，液相色谱申联质谱仪检测和确证，外标法定量，4试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为优级纯，实验室用水采用GB/工6682规定的一级水。
乙晴：色谱纯
甲醇：色谱纯。
甲酸：色谱纯。
乙酸：色谱纯
正已烷：色谱纯。
氯化钠：含量≥99.5%
0.2%甲酸的乙晴溶液：准确吸取2mL甲酸（4.3），用乙定容至1L，混勺。0.1%甲酸溶液：准确吸取1mL甲酸，用水定容至1L，混勾。4.910%乙晴的中酸-水溶液（1+9.体积比）：量取10mL乙睛（4.1）和90mL0.1%甲酸溶液（4.8），混匀。
4.10标准物质：喹诺酮药物标准品（具体信息参见附录A），纯度均大于98%。4.11标准储备液的配制：分别准确称取经纯度折算后的适量标准物质（精确到0.01g），用甲醇（4.2）稀释，难溶于甲醇的标准品，加少量中酸（4.3）溶解，再用甲醇定容至刻度，配制成浓度为2.0g/1的标准储备溶液。于一18℃以下避光保存，有效期12个月。4.12混合标准溶液的配制：准确吸取标准储备液C.5mL于10mL容量瓶中，用中醇定容至刻度（分两组配制）.此标准溶液浓度为100.0mg/L，于一18℃以下冰箱内储存，有效期6个月。4.13微孔滤膜：0.22μm，有机相型。SN/T4393—2015
5仪器和设备
液相色谱串联质谱联用仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.1
5.2吹氮浓缩仪。
5.3超声波水浴。
涡旋混合器。
低温离心机：可制冷至4℃.9500r/min。5.6均质器。
分析天平：感量0.1mg和0.001g。5.8
聚内烯离心管：15mL和50mL，具塞。5.9
移液枪，10~1000μ,10μ-100μ，1000μ5000μl6测定步骤
6.1提取
6.1.1化妆水类
称取1.0g均勾样品（精确至0.0lg），置于50mL具塞离心管（5.8）中，准确加人8mL0.2%甲酸的乙情溶液（4.7），均质3min，超声提取15min，9300r/min离心5min（4C左右），取上清液。渣再加入8ml.0.2%甲酸的乙睛，重复上述提取过程一次，9500/min离心5min后合并上清液，用0.2%甲酸的乙睛定容至20mL，混。准确吸取1mL上述提取液，40℃吹氮近干，用乙睛一0.1%甲酸溶液（4.9）定容至5mL过0.22m有机滤膜，液相色谱质谱仪测定。6.1.2润肤霜、言、乳液类
称取1.0g均勾样品（精确至0.01g），置于50mL具塞离心管（5.8）中，加人2g氯化钠（4.6），准确加人8mL0.2%甲酸的乙溶液（4.7），均质3min，超声提取15min，9500r/min离心5min（4C左右），取上清液。残渣再加人8ml.0.2%甲酸的乙腈，重复上述提取过程一次，9500r/min离心3min后合并上清液，用0.2%甲酸的乙睛定容至20ml.，混匀。准确吸取1mL上述提取液，40℃吹氮近干。用乙睛-0.1%甲酸溶液（4.9）定容至5mL，加入5mL止已烷溶液（4.5），混勾，95c0r/min离心5min弃去正己烷层，下层液过0.22um有机滤膜，液相色谱质谱仪测定。6.2混合基质标准工作溶液的制备6.2.1空白试验
称取1.0g空白试样（精确至0.01g）于50ml具塞离心管中，根据6.1操作处理后得到基质空白6.2.2基质工作曲线的配制
用基质空白（6.2.1)来配制基质标准工作曲线。6.3测定
6.3.1液相色谱参考条件
色谱柱：C1色谱柱，150mm×2.1mm（内径）.2.7(m，或相当者；a
柱温：40C；
进样量：10μL;
流动相、流速及梯度洗脱条件见表1。表1流动相、流速及梯度洗脱条件时间
质谱参考条件
aL/min
离子化模式：电喷雾离子源（ESI)，ESI模式；b)
扫描方式：多反应监测（MRM）；分辨率：单位分辨率；
其他参考条件参见附录B。
标准曲线的绘制
水（含0.1%甲酸）
SN/T4393—2015
乙情（含0.1%甲酸）
取空白样品按照6.1处理，用所得的样品溶液将混合标准溶液（4.12）稀释得到的浓度为0从g/15μg/L、10ug/L、20ug/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L.的标准工作液，按浓度由低到高的顺序进样检测，以定量离子峰面积-浓度作图：得到标准曲线。6.4定性
在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间，与基质标准溶液的保留时间偏差在上2.5%之内每种化合物的质谱定性离子至少应包括一个母高子和两个子离子·且样品中各组分定性离了的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对半度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子卡度
允许的最大偏差
6.5定量
220%~50%
10%~20%
待测样液中喹诺酮药物的响应值应在标准曲线线性范围内·超过线性范围则应稀释后再进样分析。喹诺酮药物标准溶液的多反应监测（MRM)色谱图参见附录C。SN/T4393—2015
7结果计算和表述
试样中喹诺酮药物的含量由色谱数据处理软件或按式（1）计算获得，计算结果需扣除空白值，并保留三位有效数字：
按式（1)计算试样中待测物残留量（mg/kg）：X_AXcXVX1000
A.xmx1000
式中：
试样中待测物的含量，单位为毫克每于克（mg/kg）样液中待测物的峰面积；
标准溶液中待测物的浓度，单位为微克每升（/L）：样液最终定容体积，单位为毫升（mL）：标准溶液中待测物的峰面积；
-试样的质量，单位为克（g）：稀释倍数。
8方法的定量限和回收率
8.1定量限
...(19
本方法的定量限：麻保沙星、萘啶酸、吡哌酸、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、丹诺沙星、氟罗沙星、奥比沙星、氟甲喹、二氟沙星、依诺沙星、西诺沙星、恶喹酸、洛美沙星、培氟沙罩、沙拉沙星、司帕沙星、恩诺沙星、加替沙星、巴洛沙星、克林沙星、那氟沙星、莫西沙星、妥舒沙星均为1.0mg/kg。8.2
回收率
在四个添加浓度范围内，化妆水类、润肤吾类、面霜类和润肤乳液中喹诺酮药物的回收率数据参见附录 D。
麻保沙星wwW.bzxz.Net
萘啶酸
吡哌酸
环丙沙星
氧氟沙星（氟嗪酸）
诺氟沙星（氟赈酸）
丹诺沙星（甲磺酸）
Marbofloxacin
Nalidixic acid
Pipemidieacid
Ciprofloxacin
Ofloxacin
Norfloxacin
Danofloxacin
mesylate
附录A
（资料性附录）
标准信息表
表A.1喹诺酮类药物的标准信息表分子式
ChHN,O
C.,H..FN,O.
分子量
结构式
SN/T4393—2015
115550-351
389-08-2
51940-44-4
97867-33-9
82419-36-1
70458967
119478-58-6
SN/T4393—2015
氟罗沙星
奥比沙星
氧甲噬
二氟沙房
依诺沙星（啶酸）
西诺沙星
恶喹酸
Fleroxacin
Orbifloxacin
Flumcquine
Difloxacin
Enoxacin
Cinoxacin
Oxloinic acid
分子式
表A.1（续）
分了量
CH.F.N,O,
CHIFN,O,
结构式
79660723
113617-63-3
42835256
91296-865
84294-86-2
28657-80-9
14698-294
洛美沙星
培氟沙尾
沙拉沙星
可帕沙星
恩诺沙星
加替沙星
巴洛沙星
Lomefloxacin
Pefloxacin
Sarafloxacin
hydrochloride
Sparfloxacin
Enrofloxacin
Gatifloxacin
Balofloxacin
表A.1（续）
分子式
CHuFNO
CuHFNO
CHaFN,O
CHFN,O,
分子量
结构式
SN/T4393-—2015
98079-52-8
149676-40-4
91296-87-6
110871-86-8
93106-60-6
112811-59-3
151060-21-8
SN/T4393—2015
克林沙星
那氟沙星
莫西沙星
要舒沙星
Clinafloxacin
Nadifloxacin
Moxifloxacin
Tosufloxacin
表A.1（续）
分了式
CaHaFNO,
CHEN,O
分子量
结构式
105958-99-8
124858-35-1
192927-63-2
115964-29-9
参考质谱条件为：
电喷雾电压：4500V：
辅助气压力：414.0kPa；
雾化气压力：276.0kPa：
气帘气压力：172.5kPa：
离子源温度：450℃；
碰撞气：氨气：
时间窗为：保留时间前后各90S；附录B
（资料性附录）
参考质谱条件
定性离子对、定量离子对、保留时间、锥孔电压及碰撞能量见表B.1表B.1
化合物
丹诺沙星
恩诺沙星
氟甲喹
恶喹酸
环丙沙星
沙拉沙星
萘啶酸
诺氟沙晕
依诺沙星
母离子
子离子
喹诺酮类药物的主要质谱参数
保留时间
去籁电压
人口电压
SN/T 4393—2015
碰撞气电压
碰撞池出口电压
非商业性声明：附录B所列参考质谱条件是在API5000型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅1）
为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。9
SN/T4393—2015
化合物
洛美沙足
氧氟沙星
二氟沙果
麻保沙罩
培氟沙星
司帕沙星
奥比沙星
吡哌酸
西诺沙星
氟罗沙星
加替沙星
巴洛沙旱
克林沙星
那氟沙星
莫西沙星
晏舒沙星
母离子
子离子
表B.1续）
保留时间
去簇电压
入口电压
气电压
丽池出口电压
注：*为定量离了，对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。10
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